南京医科大学研究人员发现肝细胞癌来源的外泌体传递14-3-3ζ损害肿瘤浸润T细胞的抗肿瘤功能

越来越多的证据表明，在肿瘤微环境中，肿瘤浸润T淋巴细胞（TILs）的抗肿瘤功能受到显著抑制，但其潜在机制尚未完全明了。近日来自南京医科大学鲁晓杰和孙倍成课题组的研究人员在Cell Death & Disease杂志上发表题为“14-3-3ζ delivered by hepatocellular carcinoma-derived exosomes impaired anti-tumor function of tumor-infiltrating T lymphocytes”的文章，揭示了一种由外泌体递送的新的肿瘤浸润T淋巴细胞蛋白质的功能。

肝细胞癌（HCC）占原发性肝癌的百分之九十，是世界上第五大常见癌症类型以及第二大死亡率高的癌症类型。越来越多的证据表明，在肿瘤免疫微环境（IME）中，免疫抑制细胞的数量较高，同时抗肿瘤免疫细胞的数量和功能降低。浸润到肿瘤微环境中的外周血单核细胞（PBMC）中的淋巴细胞称为肿瘤浸润淋巴细胞，是肿瘤IME的主要成分。在HCC中的研究已经证明T细胞在肿瘤微环境中的抗肿瘤作用显著下降，但其潜在机制仍不完全清楚。

14-3-3ζ，也被称为14-3-3蛋白zeta，在HCC中高度表达，并促进HCC细胞的增殖和上皮间充质转化（EMT）。此外，临床研究显示14-3-3ζ在HCC患者中的高表达与生存率显著相关。然而，14-3-3ζ在肿瘤浸润性T淋巴细胞（TILs）中的作用很少被研究。在此前的研究中，研究人员认为14-3-3ζ在HCC细胞中的表达与HCC中的TILs显著相关，然而，其潜在的机制并不清楚。

外泌体是一种含有各种小分子如RNA、DNA和蛋白质的微小囊泡。它能够多种细胞分泌并释放到微环境中，然后由其他细胞摄取。研究报道外泌体能作为与癌症耐药和转移相关的多种分子的转运者。因此，研究人员推测14-3-3ζ可能通过外泌体从HCC细胞递送到TIL并可能影响后者的功能。为了证明该猜想，研究人员设计了这项研究来探索14-3-3ζ是否通过外泌体从HCC细胞递送到TILs并且研究14-3-3ζ在TIL中的功能作用，以期提供一种新的途径探索HCC微环境中T细胞功能障碍的机制。

研究人员发现14-3-3ζ在肝细胞癌（HCC）细胞和TILs中表达上调。14-3-3ζ高表达（14-3-3ζhigh）的TIL与14-3-3ζ低表达（14-3-3ζlow）的TIL相比，表现出免疫活化（CD69）、增殖（Ki67）和抗肿瘤功能的抑制。流式细胞术检测显示与14-3-3ζlow CD8+ T细胞相比，14-3-3ζ高表达的细胞表现出更高的抑制性受体损耗表型，如PD-1、TIM-3、LAG3和CTLA-4。14-3-3ζ的过表达会抑制外周血CD3+ T细胞的活性和增殖，使初始T细胞从效应T细胞分化成调节性T细胞。此外，研究人员发现TIL中的14-3-3ζ表达水平与HCC细胞中的表达水平正相关。与HCC细胞共培养的原代T细胞或HCC细胞的培养基中均发现14-3-3ζ成分表达增加。随机光学重建显微镜（STORM）和共聚焦实验显示，来源于HCC细胞的含有14-3-3ζ的外泌体可被T细胞吞噬，表明一部分14-3-3ζ可能通过外泌体从HCC细胞转移至了至TIL。综上所述，该研究首次证明14-3-3ζ在HCC微环境中上调并抑制肿瘤浸润T细胞的抗肿瘤功能，并且14-3-3ζ可能部分通过外泌体从HCC细胞转运至T细胞。

图1：14-3-3ζhigh 和 14-3-3ζlow的T细胞在HCC中的抗肿瘤功能的不同。

图2：HCC来源的外泌体介导14-3-3ζ在T细胞中的表达增加。

参考文献：Wang X, Shen H, Zhangyuan G, Huang R, Zhang W, He Q, Jin K, Zhuo H, Zhang Z, Wang J, Sun B, Lu X. 14-3-3ζ delivered by hepatocellular carcinoma-derived exosomes impaired anti-tumor function of tumor-infiltrating T lymphocytes. Cell Death Dis. 2018 Feb 7;9(2):159.