组织切片多色荧光（mIF/mIHC）最多能做几色？看9-40色标记分析如何轻松实现

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作者：钱帮国

来源：Akoya Biosciences

近年来针对肿瘤的免疫治疗取得了突破性进展，而肿瘤微环境(Tumor microenvironment，TME)的复杂组成也制约了对于肿瘤的精准诊疗。TME是由肿瘤细胞、免疫细胞、血管及内皮细胞、纤维细胞及多种基质共同构成，并且其持续处于动态变化过程中，因此对于肿瘤治疗带来严峻挑战。

2018年度 诺奖得主 James Allison Opal多色研究实例

对于复杂肿瘤微环境（及其他生物学微环境）的准确描绘，无法通过传统的IHC实现，有赖于多色、甚至超多色的成像解决方案。为了应对这一挑战，Akoya Biosciences推出了两套解决方案，分别是快速的9色成像，和40色深度成像分析。

Akoya Biosciences 推出的Phenoptics多色定量病理创新分析方案可以为肿瘤学及其他生物学分析研究提供可靠的技术支持，其完整方案包括 Opal多重荧光免疫标记试剂、Vectra独家专利多光谱成像技术及inForm智能化分析软件，三位一体全面解析组织免疫微环境从而为肿瘤学及生物研究提供精准方案。

快速学会9色

TSA 酪胺信号放大及Opal多色荧光标记

基于酪胺信号放大(Tyramine Signal Amplification，TSA) 技术衍生而来的Opal多重荧光免疫组化在肿瘤免疫中已被广泛使用，利用酪胺与抗原蛋白之间共价键的稳定结合可实现抗原的荧光标记。Opal多重荧光免疫组化彻底解决了荧光染色中抗体种属选择限制，在设计抗体组合时只需要选择最优的抗体即可而无需担心种属同源。

酪胺信号放大染色 (TSA) 与传统染色方案对比

Opal 9色 肺癌样本多色荧光标记示例图

快速学会9色

Vectra 专利多光谱显微成像及光谱拆分

经由Opal多色标记的样本包含多维的生物学信息，包括组织结构信息、细胞空间分布信息、信号通路蛋白或细胞功能标识物的共表达信息等。

基于Vectra多光谱独家专利成像及拆分技术可实现多达9色样本荧光成像，其在病理学分析中具有其独特的技术优势。对于明场免疫组织化学染色样品，借助多光谱成像同样可以对混杂的明场染料(DAB,Vector Red等)进行有效识别、拆分和定量分析。

Opal 多色荧光标记多光谱成像及拆分展示

独特的 Vectra 光谱图像荧光及明场视图一键切换

快速学会9色

inForm 人工智能定量病理分析

对于复杂组织的病理分析，因为组织样本的形态结构与组成极为复杂(如肿瘤、基质、血管、坏死组织等)，造成普通软件无法自动识别不同的组织类型，新型inForm定量病理分析软件将智能组织识别算法与多标记分析融为一体，智能化将研究者的判读经验转变为客观算法，从而实现针对特定区域的定量统计分析。

inForm 智能化定量病理数据分析

Opal多重荧光染色、Vectra多光谱成像及inForm智能病理分析三者融为一体构成了完整的Phenoptics定量病理及微环境景观分析方案，其大幅提高组织病理分析数据的准确度，有助于从病理切片样本中挖掘出更丰富、更可靠的生物学信息，未来将为肿瘤学及生命科学等研究带来革命性改变。

轻松实现40+

CODEX单细胞空间蛋白组学分析平台

CODEX分析平台是Akoya Biosciences另一款创新产品，作为2019年的创新科技产品，CODEX的核心原理是抗体上标记特异寡核苷酸“条码标签”(Barcode)，成像荧光染料是通过和Barcode互补的寡核苷酸序列特异性结合，使得CODEX突破荧光成像通道数量的限制，轻松实现40种指标的同时检测及分析。

CODEX分析平台实验流程及原理

轻松实现40+

CODEX一体化染色、成像、定量分析平台优势

· 可在全切片上同时快速检测40种以上生物标志物

· 深度分析整个组织样本的复杂空间信息

· 可检测冰冻样本、石蜡组织样本、PBMC涂片等样本

· 一体化解决方案，包含试剂、仪器及分析软件

· 样本完整保留，可用于后续感兴趣区域(ROI)分析或其他染色分析

PBMC单核细胞26色荧光标记示例图

轻松实现40+

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