病毒保存液技术要求
在引起人类传染病流行的病原体(病毒、细菌、真菌、寄生虫等)中,病毒(virus)是最为常见的一类,它最重要的特征是非细胞结构,病毒体主要由核酸和蛋白质组成,只含一种核酸,没有产生能量的酶系统,只能在活细胞内以复制方式增殖,病毒体微小,用于测量的单位为纳米(nm),最大直径300纳米(如痘病毒类),最小直径20纳米。病毒的这种特征使得它离开细胞就无法存活,而要研究这些病毒就需要依赖病毒保存液来延长病毒的存活时间。
现今研究出的病毒保存液分为灭活型和非灭活型:
左为非灭活型保存液右为灭活型保存液
1、灭活型病毒保存液:它是一种无色透明液体,适用各种类病毒,包括新型冠状病毒、流感病毒、手足口病毒、风疹病毒等。它采用高浓度的胍盐对病毒进行快速地灭活、保存,以使样品失去感染性。已灭活的样品可配套使用相对应的新型冠状病毒RNA提取试剂盒,M32/M96核酸提取仪等快速提取病毒核酸,同时配合新型冠状病毒PCR检测试剂盒实现快速检测,特异性灵敏度均不受影响。可适用试剂盒方法:荧光PCR法、联合探针锚定聚合测序法、恒温扩增芯片法,磁微粒化学发光法,胶体金法。
2、非灭活型病毒保存液:成分为Hanks液基础,庆大霉素,真菌抗生素,BSA (V) ,冷冻保护剂、生物缓冲剂及氨基酸等,多种抗生素联合,具有抗细菌和抗真菌的作用;牛血清白蛋白(BSA)作为蛋白质稳定剂,可在病毒的蛋白质外壳形成一种保护膜,使其不易分解,保证病毒的完整性;Hanks缓冲液构建的中性环境,有助于增加病毒的生存时间和感染稳定性。
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