LSL条件性表达载体是什么?

常规质粒基因表达载体系统利用LoxP-Stop-LoxP(LSL)表达盒,在哺乳动物细胞和动物体内实现Cre介导的条件性基因激活表达。LSL表达盒包含三个重复的SV40 polyA,序列两端为LoxP位点。用户选择的启动子位于LSL表达盒的上游,而用户感兴趣的基因位于其下游。在Cre重组酶不存在的情况下,该表达盒完全阻断了目的基因的正常表达;当将Cre引入携带该载体的细胞中时,目的基因上游的LSL表达盒将会被删除,从而目的基因能够在用户选择的启动子下被永久激活表达。

该载体不仅适用于体外细胞培养,更适用于转基因动物模型的构建。当携带这种载体的转基因动物与携带组织特异性表达Cre的转基因动物杂交时,产生的动物后代将在特定的细胞中组织特异性表达Cre,从而启动目的基因在该特定细胞中组织特异性表达。

在细胞培养中使用该载体系统时,可将抗生素或荧光标记添加到载体中,使转染后的细胞可被筛选或可示踪以便于分离出已永久整合载体的细胞。

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