发光试剂几种吖啶酯的比较
吖啶酯是一种可用作化学发光标记物的化学物质,吖啶盐和相关化合物已被广泛证明为非常有用的化学发光标记物,其稳定性、标记特异性和检测灵敏度都超越放射性同位素。在碱性条件下,NHS 作为离去基团被取代,蛋白质与吖啶酯形成稳定的酰胺键。但是,吖啶酯只是吖啶盐的一个总称,若细分下来,德晟总共能提供7种不同的的吖啶酯(见下表)供各位选择,那么究竟这7中吖啶酯有什么异同点呢?让我们继续向下看。
利用吖啶酯的磁微粒化学发光法
1. 德晟吖啶酯种类:
1.1 吖啶酯0号-吖啶酯(AE-NHS )
【CAS】无
【外观】黄色固体或粉末
【纯度】≥98%
【分子量】N/A
【存储条件】-20℃,避光
【运输条件】48小时内可室温(20-25℃)运输,超过48小时需要在-20℃条件下运输
1.2 吖啶酯1号-吖啶酯(DMAE-NHS)
【英文名】2',6'-dimethyl-4'-(N-succinimidyloxycarbonyl)phenyl-10-methyl-acridinium-9-carboxylate methosulfate
【中文名】9-[[4-[[(2,5-二氧代-1-吡咯烷基)氧基]羰基]-2,6-二甲基苯氧基]羰基]-10-甲
基吖啶硫酸甲酯盐
【CAS】115853-74-2
【外观】黄色固体或粉末
【纯度】≥98%
【分子量】594.13,C29H26N2O10S
【存储条件】-20℃,避光
【运输条件】48小时内可室温(20-25℃)运输,超过48小时需要在-20℃条件下运输
1.3 吖啶酯2号-吖啶酯(Me-DMAE-NHS)
【英文名】2',6'-Dimethylcarbonylphenyl 10-Methyl-9-acridinecarboxylate 4'-NHS Ester Triflate
【中文名】2',6'-二甲基羰基苯基10-甲基-9-吖啶甲酸酯4'-NHS酯三氟甲基磺酸盐
【CAS】无(115853-74-2, DMAE-NHS类似物)
【外观】黄色固体或粉末
【纯度】≥98%
【分子量】632.56,C29H23F3N2O9S
【存储条件】-20℃,避光
【运输条件】48小时内可室温(20-25℃)运输,超过48小时需要在-20℃条件下运输
1.4 吖啶酯3号-吖啶酯(NSP-DMAE-NHS)
【英文名】2',6'-DiMethylcarbonylphenyl-10-sulfopropylacridinium-9-carboxylate 4'- NHS Ester
【中文名】9-[[4-[[(2,5-二氧代-1-吡咯烷基)氧基]羰基]-2,6-二甲基苯氧基]羰基]-10-(3-
磺基丙基)-吖啶内盐
【CAS】194357-64-7
【外观】黄色固体或粉末
【纯度】≥98%
【分子量】590.6,C30H26N2O9S
【存储条件】-20℃,避光
【运输条件】48小时内可室温(20-25℃)运输,超过48小时需要在-20℃条件下运输
1.5 吖啶酯4号-吖啶盐(NSP-SA)
【英文名】3-[9-(((3-(carboxypropyl)[4-methxylphenyl]sulfonyl)amine)carboxyl]-10-acridiniumyl)-1-propanesulfonateinner salt
【中文名】吖啶盐(NSP-SA)
【CAS】211106-69-0
【外观】黄色固体或粉末
【纯度】≥98%
【分子量】584.66,C28H28N2O8S2
【存储条件】-20℃,避光
【运输条件】48小时内可室温(20-25℃)运输,超过48小时需要在-20℃条件下运输
1.6 吖啶酯5号-吖啶盐(NSP-SA-NHS)
【英文名】3-[9-(((3-(N-succinimidyloxycarboxypropyl)[4-methxylphenyl]sulfonyl)amine)carboxyl]-10-acridiniumyl)-1-propanesulfonateinner salt
【中文名】吖啶盐(NSP-SA-NHS)
【CAS】199293-83-9
【外观】黄色固体或粉末
【纯度】≥98%
【分子量】681.73,C32H31N3O10S2
【存储条件】-20℃,避光
【运输条件】48小时内可室温(20-25℃)运输,超过48小时需要在-20℃条件下运输
1.7 吖啶酯6号-吖啶酰肼(NSP-SA-ADH)
【CAS】无
【外观】黄色固体或粉末
【纯度】≥98%
【分子量】740.85,C34H40N6O9S2
【存储条件】-20℃,避光
【运输条件】48小时内可室温(20-25℃)运输,超过48小时需要在-20℃条件下运输
二.吖啶酯的结构区别
六种吖啶酯,其中 1~3 号为吖啶酯类;4~6 号为吖啶磺酰胺内盐;1~4 号为 NHS 活性酯;5 号为吖啶 羧酸,含羧基;6 号为吖啶酰肼,含有游离氨基。
三.抗水解性能与稳定性
传统吖啶酯 0 号(AE-NHS),1~3 号在其结构上进行了修饰,增大了位阻,增强了抗水解性。0 号只在 酸性溶液中稳定,当 pH 值大于 6.3 后易水解,而 1~3 号则不然,如在室温下,在 pH 为 7.0 的 PB 缓冲液中很
稳定,16 天后,发光活性只降低 3.6%。
4~6 号则是引入了磺酰胺基团,其稳定性较吖啶酯类(0~3 号)高, 其原因是由于 C-N 键与 C-O 键的
键级不同,C-N 键大于 C-O 键。吖啶酰胺类化合物(4~6 号)抵抗水解的能力也强于吖啶酯类(0~3 号)化合
物。4~6 号在酸性溶液中(pH<4.8)都很稳定,与蛋白质偶联物在室温下保存 4 周,其光量子产率不降低,冻干品
在-20℃下,可以保存一年以上.
四.亲水性
3~6 号在 1~2 号的基础上,在亲水性上进行了修饰,引入了丙磺酸内盐,增加了其水溶性,使其与抗体、
核酸等形成的标志物有水溶性,在之后的发光检测可以在水中进行。
五.标记方式的区别
由于抗体的实质是蛋白,其含有胺基,可直接与 1~4 号(NHS 活性酯)发生反应,进行偶联。
5 号为吖啶羧酸,需要加入缩合剂 EDCI 等,才能与含胺基的蛋白发生偶联反应。
6 号为吖啶酰肼,含有游离氨基,吖啶酰肼末端适用直接偶联含有醛基的多糖,核酸或者蛋白质等。
六.发光性能的比较
由于 1~6 号吖啶,它们的发光母体与机理一致,其发光性能应该差别不大。