移液器使用——基本操作
移液枪的发展史
移液枪的历史很短暂，从移液枪的雏形出现到现在也仅仅刚过50年而已，很年轻。
01
1958年
德国Eppendorf（艾本德）公司发明了第一支移液枪，是为单道固定量程移液枪
02
1968年
芬兰Labsystem（雷勃）发明了多道固定量程移液枪，俗称“芬兰枪”
03
1972年
法国Gilson推出了第一支单道可调量程移液枪，并把它命名为Pipetman
04
1984年
美国RAININ（瑞宁）开始让世人体会电动移液枪的快感
分类和原理
排气式移液枪（内置活塞）
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这种移液枪需要一次性枪头，枪头与液体接触。排气式微量移液枪通过活塞驱动，排出空气，由此，垂直运动的金属或陶瓷活塞在密闭的筒管中制造出真空。当活塞向上抽动，压缩后半部气体，而前一半空间则变成了真空。此时，枪头附近的液体便进入了真空部分，随后便可转移或再次排出。这种移液枪准确度和精密度很高，适用于常规移液操作。然而，由于其依赖于气体的移动、压缩，准确度受环境条件的影响较大，特别是温度、气压和使用者的技术。因而，这种移液枪必须妥善保存和校准，使用者也必须经过训练，练习正确和稳定的操作技术。
正置换移液枪（外置活塞）
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这种移液枪与排气式移液枪相类似，但是更少用，通常用于避免污染，或用于体积小、挥发性或有粘性的物质，比如易挥发性有机物、DNA等。主要的差别在于其一次性尖端是一个带活塞的微量调节注射枪活塞，由塑料制成，活塞与液体直接接触吸取和排出液体。
移液枪的结构
移液枪的结构
Structure of pipette
1.控制按钮
2.体积调节旋钮
3.吸头脱卸按钮
4.体积显示窗口
5.密度调节孔：用于移液枪的密度调节，出厂时贴有ADJ银色标签，表明符合出厂设定
6.密度调节窗口：移液枪出厂时，默认设置为“0”
7.标记区：可用于移液枪的标记
8.套筒：用于脱卸枪头
9.弹性吸嘴：具有伸缩性，优化安装和脱卸枪头的用力
10.枪头：推荐使用原装枪头
常规操作指南
艾本德工程师示范
下面是操作的中文译解
>1. 装枪头
移液枪套柄用力下压，需要时小幅度旋转即可。
错误操作：用力敲击吸头。此方法会带来吸头损坏甚至移液枪套柄磨损，从而影响其密封性。
>2. 量程设定
操作之前请先选择正确的移液枪可提高1%准确性，推荐在30-100%量程范围内操作。空气柱的体积越小，误差越低。
>3. 润洗
用同一样品重复吸液排液二至三次，可提高0.5%准确性，润洗为以后每次吸液提供相同的接触面，保证操作的一致性。注意：高温或者低温液体勿润洗
>4. 枪头浸入角度
吸液时尽量保持垂直状态可提高0.5%准确性，倾斜角度不能超过20°。
>5. 枪头浸入深度
浸入深度正确可提高0.5%准确性：＜10μL 1-2mm，10-200μL 2-3mm，200-2000μL 3-6mm，＞2000μL 6-10mm。
>6. 枪头浸入时间
浸入时间：吸液后在液面中保持一秒钟再将吸头平缓移开，这对于大容量移液枪或者吸取粘性样品尤为重要。
>7. 吸液速度
匀速连贯移液，控制好移液速度可提高5%准确性，太快会造成喷液，液体或者气雾冲入移液枪内部，污染活塞等部件。
>8. 排液及吹液
正确分液可提高1%准确性，先将活塞按至第一档排液，略作停顿后按至第二档进行吹液。
>9. 手温
移液枪不宜长时间握在手里，不用时最好将其挂在支架上或者挂在手上晾一下。
移液器精准度及错误分析
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01 |
影响移液枪精度因素 |
（1）温度：室温低时，手温较高，使得空气膨胀，吸入冷溶液时往往发生误差
（2）气密性：枪头和枪体的结合部，以及枪内柱体之间的长期磨损，造成误差
（3）吸速：容易造成枪头内气泡产生，而且会污染枪头
（4）试剂的挥发：吸挥发性高的试剂时，蒸气进入枪头，内压增高，因此漏液。
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02 |
错误操作及分析 |
（1）错误：装配枪头时用移液枪反复撞击枪头以上紧
正确：插入枪头，左右轻转旋转上紧枪头
分析：撞击会造成移液枪内部齿轮组合的松动，长期操作会对移液枪的精确性造成影响。
正确：选用与移液枪匹配的，有质量保证的枪头
分析：枪头的不匹配，主要表现为对气密性的影响。会直接影响移液枪的精确性，通常会移液操作会小于设定量。
正确：垂直吸液
分析：倾斜的状态会造成气压面的改变。会对移液精度造成影响。
正确：将移液枪垂直挂在移液枪支架上
分析：枪头内含有未打出液体，移液枪平放之后液体有可能会流到移液枪体内部，这会对移液枪内部组件造成影响，严重的回造成损坏，较差污染等情况的发生。
正确：不建议用普通移液枪做强挥发型液体转移
分析：如果一定要移取强挥发性的液体，应该在移液结束后立刻拆开移液枪，让蒸汽挥发。建议使用外置活塞式移液枪。
以上只是基本操作，对于特殊移液及维护知识，我们下期再聊。