转基因植株构建(敲除)技术原理

CRISPR/Cas9植物敲除载体系统是一款高效、精准的基因编辑载体，它是基于最新一代的人工核酸内切酶CRISPR/Cas9而研发的，相对于传统敲除技术和TALEN、ZFN技术而言，其操作更加简便，敲除效率更高，基因的编辑更加的精准，大大降低了脱靶机率。

pP1C系列载体是CRISPR/Cas9系统在植物中应用的载体，支持使用农杆菌介导进行的随机整合以及原生质体共转的瞬时表达系统。pP1C载体系列中使用的Cas9基因已按照人密码子进行优化，其核定位信号已经文献报道能够正常发挥其作用，并在多种植物中得到实践。

根据您的研究对象，您可以选择适用于单子叶植物的pP1C.3载体（OsU3启动子），或者适用于双子叶植物的pP1C.4载体（AtU6启动子），pP1C.7 载体是 CRISPR/Cas9 系统在单子叶植物中应用的双敲除载体（OsU6 和 OsU3 启动子）。

CRISPR/Cas9 工作原理示意图

内容

由于植物实验特殊性（特殊培养条件以及实验设备等），目前吉锐生物只承接植物敲除载体构建服务，实验周期1-2周。

构建成功的载体系统能够让您仅靠单个载体就可以轻松地完成基因组DNA的编辑，实现精准、低off-target的基因编辑体验。

吉锐生物可以为您提供完整的基因敲除解决方案，从敲除方案设计、敲除位点设计、载体构建，到转染、敲除检测、结果分析，让您的实验一次成功！

实验流程

1.敲除靶位点设计；

2.敲除载体构建；

3.愈伤组织获得；

4.转基因阳性组织获得；

5.确保目的基因敲除。