Tris-Hcl溶液的配置方法有哪些?

Tris-Hcl中文全称三羟甲基氨基甲烷盐酸盐,别称Tris盐酸盐,英文名TRIS hydrochloride。相信许多人对Tris都不陌生,Tris的应用非常广泛,Tris缓冲液不仅被用作核酸和蛋白质的溶剂,还有许多重要用途。

Tris被用于不同pH条件下的蛋白质晶体生长。Tris缓冲液的低离子强度特点可用于线虫核纤层蛋白中间纤维的形成。Tris也是蛋白质电泳缓冲液的主要成分之一,其在电泳缓冲液中与甘氨酸构成缓冲体系,稳定电泳过程中的pH。此外,Tris还是制备表面活性剂、硫化促进剂和一些药物的中间物。Tris也被用作滴定标准物。 作为蛋白缓冲液时,若后续工作需要质谱,则不适宜用Tris,尽量换成其他质谱仪可耐受的缓冲液。

而Tris-HCl是由Tris作为主要原料反应得来的,其溶液呈酸性,主要用作生物缓冲液,来调整病毒保存液的pH值。如果需要调整至中性或者碱性,可以添加Tris或者NaOH来实现。除开这些信息外,Tris-Hcl的配置方法有哪些?你知道多少?下文将介绍Tris-Hcl的配置方法。

Tris-HCl缓冲液的配制方法:

1、Tris-Hcl(0.05mol/L,25℃)

使50ml 0.1mol/L三羟甲基氨基甲烷(Tris)溶液与x ml 0.1mol/L 盐酸混匀后,加水稀释至100ml

PH                 x/ml                PH                x/ml

7.1                 45.7                8.1                26.2

7.2                 44.7                8.2                22.9

7.3                 43.4                8.3                19.9

7.4                 42.0                8.4                17.2

7.5                 40.3                8.5                14.7

7.6                 38.5                8.6                12.4

7.7                 36.6                8.7                10.3

7.8                 34.5                8.8                 8.5

7.9                 32.0                8.9                 7.0

Tris分子量=121.14:0.1mol/L溶液为12.114g/L。Tris溶液可从空气中吸收二氧化碳,使用时应将瓶盖盖严。配置不同浓度和不同PH值Tris-Hcl溶液时,可以先配成一定PH值的0.05mol/L溶液,再稀释到所需浓度。

2、1M Tris-Hcl(PH7.4、PH7.6、PH8.0)

组份浓度1M Tris-Hcl

配置量 1L

配置方法:

一、称量121.1g Tris置于1 L烧杯中;

二、加入约800ml的去离子水,充分搅拌溶解;

三、按下面数值加入浓HCL量调节所需要的PH值;

PH值          浓HCL

7.4            约70ml

7.6            约60ml

8.0            约42ml

四、将溶液定容至1L;

五、高温高压灭菌后,室温保存。

3、1.5M Tris-Hcl(PH8.8)

组份浓度1.5M Tris-Hcl

配置量 1L

配置方法:

一、称量181.7g Tris置于1L烧杯中;

二、加入约800ml的去离子水,充分搅拌溶解;

三、用浓Hcl调节PH值至8.8;

四、将溶液定容至1L;

五、高温高压灭菌后,室温保存。

需要注意溶液的冷却应至室温后再调定PH值,因为Tris溶液的PH值随温度的变化差异很大,温度每升高1℃,溶液的PH值大约降低0.03个单位。

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