实验诊断-临床常见病原体检测:病毒性肝炎检测

病毒性肝炎检测

病毒性肝炎检测
一、甲型肝炎病毒检测
(一)抗原检测
HAVAg一般于发病前1~15天可从粪中排出,2周后消失,临床上不易捕捉到。粪便中HAV或HAV抗原颗粒检测可作为甲肝急性感染的证据。
(二)抗体检测
1.抗HAV-IgM 在发病后2周抗HAV-IgM的阳性率为100%,12个月时可为阴性。
2.抗HAV-IgA 早期和急性期,由粪便中测得抗HAV-IgA呈阳性反应,是早期诊断甲肝的指标之一。
3.抗HAV-IgG 阳性出现于恢复期且持久存在,是获得免疫力的标志,提示既往感染,可作为流行病学调查的指标。
(三)HAV-RNA测定
HAV-RNA阳性对诊断特别对早期诊断具有特异性。
二、乙型肝炎病毒检测
(一)乙肝六项检测
1.HBsAg  阳性见于急性乙肝的潜伏期,发病时达高峰;如果发病后3个月不转阴,则易发展成慢性乙型肝炎或肝硬化。携带者 HBsAg也呈阳性。
2.抗-HBs  是保护性抗体,可阻止HBV穿过细胞膜进入新的肝细胞。抗-HBs一般在发病后3~6月才出现,可持续多年。
3.HBeAg  阳性表明乙型肝炎处于活动期,并有较强的传染性。
4.抗-HBe  阳性可见于慢性乙型肝炎、肝硬化、肝癌。
5.抗-HBc  抗-HBc总抗体主要反映的是抗-HBc IgG。抗-HBc比HBsAg更敏感,可作为HBsAg阴性的HBV感染的敏感指标。在HBsAg携带者中多为阳性。
6.HBcAg  阳性,提示病人血清中有感染性的HBV存在,含量较多表示复制活跃,传染性强,预后较差。
(二) 乙型肝炎病毒表面抗原蛋白前S1和前S1抗体测定
前S1抗原可识别肝细胞表面特异性的病毒受体,是非常重要的传染性指标。同时血清前S1抗原的存在与病毒复制的关系密切。作为病毒复制指标较HBeAg敏感,可以反映HBeAg阴性乙肝病人体内的病毒活动状况,避免由于HBeAg阴性造成的误诊和漏检,对“二对半”检测起重要的补充作用。前S1抗原阴转越早、前S1抗体阳转越早,病人病程越短、预后越好。
(三)乙型肝炎病毒表面抗原蛋白前S2和前S2抗体测定
Pre-S2阳性提示HBV复制异常活跃,有传染性。抗 Pre-S2阳性见于乙肝急性期及恢复早期;提示HBV已被清除,预后较好。
(四) 乙型肝炎病毒DNA测定
HBV-DNA阳性是诊断乙型肝炎的佐证,表明HBV复制及有传染性。也用于监测应用 HBsAg疫苗后垂直传播的阻断效果,若 HBV-DNA阳性表明疫苗阻断效果不佳。
(五)乙型肝炎病毒YMDD变异测定
YMDD是HBV反转录酶发挥催化活性所必需的关键结构。目前临床上广泛使用的胞苷类似物拉咪呋啶(lamivudine)等抗HBV药物,作用靶位主要是HBV反转录酶,通过与底物dNTP竞争结合以抑制HBV的反转录和复制。当病毒YMDD中M突变为异亮氨酸(I)或缬氨酸(V), 就可能引起HBV该类药物的药效丧失,从而产生耐药性。YMDD测定结果为临床抗HBV治疗用药提供了实验室诊断依据。
三、丙型肝炎病毒检测
(一)丙型肝炎病毒RNA测定
阳性提示HCV复制活跃,传染性强;HCV-RNA转阴提示HCV复制受抑,预后较好。连续观察HCV-RNA,结合抗-HCV的动态变化,可作为丙肝的预后判断和干扰素等药物疗效的评价指标。检测HCV-RNA,对研究丙型肝炎发病机理和传播途径有重要价值。
(二)丙型肝炎病毒抗体测定
1.抗-HCV IgM抗体  主要用于早期诊断,抗-HCV IgM抗体一般在发病的2~4天出现,持续阳性常可作为转为慢性肝炎的指标,或是提示病毒持续存在并有复制。
2.抗-HCV IgG抗体  阳性表明已有 HCV感染但不能作为感染的早期指标。经常接受血制品(血浆、全血)治疗的病人可以合并HCV的感染,易使病变转为慢性、肝硬化或肝癌。
四、丁型肝炎病毒检测
(一)丁型肝炎病毒抗原测定
丁型肝炎病毒抗原(HDVAg)出现较早,但仅持续 l~2周。HDVAg与HBsAg同时阳性,表示丁型和乙型肝炎病毒同时感染,病人可迅速发展为慢性或急性重症肝炎。
(二)丁型肝炎病毒抗体测定
1.抗-HDV IgG  阳性只能在HBsAg阳性的血清中测得,是诊断丁型肝炎的可靠指标,病愈后仍可存在多年。
2.抗-HDV IgM  出现较早,一般持续2~20周,可用于丁型肝炎早期诊断。
(三)丁型肝炎病毒RNA测定
阳性可明确诊断为丁型肝炎。HDV与HBV重叠感染的病人易迅速发展成肝硬化或肝癌。
五、戊型肝炎病毒检测
1.抗-HEV IgM  95%的急性期病人呈阳性反应,8个月后全部消失。抗-HEV IgM的持续时间较短,可作为急性感染的诊断指标。
2.抗-HEV IgG  恢复期抗-HEVIgG效价超过或等于急性期4倍,提示有HEV新近感染。
3.HEV RNA  病人血清、胆汁和粪便中的HEV RNA阳性可诊断急性戊型肝炎,急性期血清中HEV RNA的检出率可达70%。此外,在对抗体检测结果进行确证,判断病人排毒期限,分子流行病学研究等方面也具有临床意义。
六、庚型肝炎病毒检测
1.抗-HGV  阳性表示曾感染过HGV,多见于输血后肝炎或使用血液制品引起HGV合并HCV 感染的病人。但ELISA法特异性和敏感性不高,尚需继续完善。
2.HGV RNA  阳性表明有HGV存在。HGV对人类的致病性尚存在争议。一方面,HGV在各型肝炎及其高危人群中均以一定比例存在,尤其在非甲、非戊型肝炎病人中有一定的检出率,在急性重型肝炎中也发现了HGV, 提示可能是人类肝炎的一种病原体, 且在重型肝炎中起一定作用。另一方面, HGV RNA在肝/血浆的比率远低于其他嗜肝病毒,表明HGV的主要复制地可能不在肝脏:HGV感染者多缺乏或仅有轻微肝损害;HGV RNA毒血症虽可持续多年但并不导致慢性肝损害等。这些现象表明HGV可能并非嗜肝病毒。
七、输血传播病毒(TTV病毒) 检测
TTV DNA阳性表明有TTV存在。普通人群中TTV阳性率较高,国内献血员阳性率为11%~15%。由于TTV 具有高度基因变异性,不同基因亚型抗体间存在交叉反应,有些核酸阳性者因病毒量较少,不足以刺激免疫系统发生免疫应答而产生抗体;或因为感染时间较短尚未产生抗体可造成ELISA实验结果与PCR检测结果不一致,致使ELISA法的临床应用受到一定的限制。

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