Image lab 如何定量蛋白条带
1、首先打开Image lab,打开一张Image lab电泳图片。
2、点击“泳道和条带”,找到“泳道”下“手动”功能,输入泳道号(比如有13个泳道就写13)。
3、在“所有泳道”功能下面可以选择调整泳道框的大小。条带没有那么弥散或长,可以相应调整框大小。
4、在“单个泳道”下面,具有几个功能项,点击“移动”把框与条带一一对应。还可以调整单个框的宽度,点击“宽度”功能。
5、把所有条带都限定在框内之后,然后选择上面的“条带”功能下面的“检测条带”,有些选项可以自己调整,比如灵敏度之类,之后会自动识别条带。
6、退回到“分析工具箱”,选择“定量工具”,相对和绝对定量可以自己决定。选择“相对”,然后点击“选择”即选择哪一个泳道的条带为1,其余相对于其进行比较。选择之后,下一步点击工具栏中的“分析表”选项,每个泳道的定量结果就会显示出来。选择结果上面的“将分析表导出至文件”按钮,结果会以Excel表格形式自动导入你所打开的WB图像的文件中。
7、将“相对定量”数值记录下来,目的蛋白的值与内参值的比值即使相对定量结果。
上述方法,框的大小调整有一定的限度,对于有些条带较小的,高度可能不适合。只能选择“体积工具”。
8、“体积工具”中的“矩形”选项,点击条带中最大的那个,调整框大小,使矩形刚好容纳条带,不要太大。然后按Ctrl+C复制粘贴,将各个矩形全部限定图中的条带,移动使得矩形完全把条带限定在框内。
9、然后选择其中一个条带作为对照“1”,双击该矩形,会出现“体积类型”、“数量”、“参考体积”等选项,打勾“参考体积”,确定。
10、然后点击“分析表”,各种定量结果会显示出来。同样选择从左数第四个按钮“将分析表导出至文件”。
其余操作如上。
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