pUC19 DNA是什么?

pUC19是表达Amp抗性的常用克隆载体,由pBR322克隆载体修改而来(Yanisch-Perron et al., 1985)。pUC19具有与pBR322相似的复制起始点,同属ColE1质粒家族,这类质粒的复制是由RNA I产物起始的,在宿主没有蛋白质产生的情况下依然能复制,属于relaxed control型质粒。但与pBR322复制起始点不同的是pUC19的RNA II序列中做了点突变和缺失了Rop基因,这使得pUC19拥有显著更高的质粒拷贝数。pUC19具有大肠杆菌β-半乳糖苷酶(lacZ)基因的N端片段,又称为α片段,并且在lacZ的第6和第7个密码子之间插入了54 bp长的多克隆位点序列,包含13种限制性核酸内切酶位点。因此,使用pUC19克隆片段时,可采用蓝白斑筛选方法鉴定克隆产物。

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