m6A在线预测网站——SRAMP
点击“Prediction”按钮
选择预测的模型
左边的“Full transcript mode”在对编码和非编码RNA进行预测时,建议使用此模式。 注意,在该模式中,应使用完整转录物(具有内含子)而不是成熟mRNA / cDNA序列的基因组序列。而对于没有完整基因组序列的用户来说,可以选择右侧的“Mature mRNA mode”,这种预测模式是一种备选解决方案,相对来说预测的准确性不如左边的,该模型适用于成熟mRNA(cDNA)序列,不能预测内含子中的m6A位点。
下面我们演示的是网站默认的test1(TROVE2)序列,后面的选项都是默认的,点击“Submit”就可以预测序列的m6A结合位点了。
耐心的等待
预测结果
有两个结合位点,在“Decision”列中可以看出预测的两个结合位点具有很高的可信度。SRAMP网站提供了几个阈值:99 %/95%/90%/85%,分别对应very high/high/moderate/low的自信度,当然我们一般都挑选“very high”啦。预测结果是按照“Position”位置排序的,所以还需要综合各个位点“Score”情况。
SRAMP网站还提供了RNA二级结构m6A位点结合预测功能,写材料,发文章,有个图不是更加美观?看到这个画面的时候,网站默认选项是“NO(default)”,我们选择“YES(much slower)”,然后点击“Submit”就行,计算过程需要花更多的时间,这个取决于提交序列的长度,请各位客官耐心等待。
预测结果
点击“Draw”,RNA二级结构m6A位点预测图就出来了
SRAMP网站运算速度比较慢,如果需要预测的序列较多,有一台不错的电脑,可以自行下载SRAMP tool(压缩包大概2G),同时安装R语言和Perl语言就可以运算了。
SRAMP算是一个不错的网站,界面相当简洁,由北京大学创建