大连理工:Anal. Chem.:基于聚苯胺微阵列的单细胞细胞外pH高通量实时监测

通讯作者:银冰;吴硕
通讯单位:大连理工大学
在单细胞水平,尤其是在癌细胞中实时监测细胞外pH(pHe)对于阐明疾病发展机制、病理过程和研究药物作用至关重要。然而,细胞外质子的高扩散系数、高迁移率和异质分布,使得实时监测pHe仍然存在一些挑战。因此,迫切需要开发高通量、高时空分辨率和实时监测方法来检测单细胞水平的pHe。
基于此,大连理工大学吴硕教授和银冰教授展示了一种基于聚苯胺(PANI)微电极阵列的高通量、高时空分辨率平台,用于长期、实时监测单细胞pHe。PANI微电极阵列不仅具有pH6.0~7.6的高灵敏度(57.22 mV/pH),而且可靠性高(洗涤后PANI膜仍光滑、致密,灵敏度为55.9 mV/pH)。
研究人员使用多通道设备检测大量细胞的单细胞pHe变化并绘制细胞外环境中的pHe分布图。结果表明,癌细胞区域的pHe低于周围空白区域的pHe,并且不同癌细胞的pHe变化在细胞呼吸和药物刺激过程中表现出显着的细胞异质性。
该平台基于传统的微纳制造技术和电化学沉积方法,具有大规模生产和实际应用的前景。微电极芯片可以作为一个重要的原位平台,用于长期跟踪pHe以研究癌细胞的异质性。相关工作以“High-Throughput and Real-Time Monitoring of Single-Cell Extracellular pH Based on Polyaniline Microarrays”为题发表在Analytical Chemistry上。
图1. PANI微阵列pH传感器制备和表征。

图2.在单细胞水平上使用传感器对活细胞进行实时高时空分辨率pHe检测。

图3. 药物作用下HeLa细胞的pHe检测。

图4. 细胞和不同细胞系之间的异质性研究。

链接:https://doi.org/10.1021/acs.analchem.1c02560
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