蛋白质与原卟啉IX及复合物发光机理的研究
原卟啉(Protoporphyrin X)与蛋白质结合物的吸收、荧光的激发、发射光诺,在光作用下,其可见区发光(入mar 635 nm左右)与吓啉有关,而紫外区发光(入naz 422 nm左右)与蛋白质的色氨酸残基有关,其光诺特性与临床诊断选择的癌固有荧光特征峰基本相符。该研究结果为探讨癌的发光机理积累了有益资料。
实验:
材料:原吓啉二钠盐(Protoporphyrin Naz,简称为PP),经乙醚重结晶,牛血m白蛋白(Bovine Serum Albumin,简称为BSA)。原离子水经重蒸后使用。实验在室温中进行。
仪器:HITACHI MPF-4荧光分光光度计,SHIMADZU紫外可见分光光度计。
制备方法∶蛋白质与卟啉结合物的制备,分离和纯化是参照william T.等人方法(3,按牛血清白蛋白与原吓啉Ⅳ克分子1:5配制,在37℃保温30min,蛋白质与原叶啉X结合物分离是用聚丙烯酰胺电泳中进行的{3,然后借紫外灯光从凝胶电泳分离带中提取BSA-PP带,从凝胶带分离提取BSA-PP,收集提取液并对p 7.2PBS透析,用pH 7.2PBS配制BSA-PP测试液,使其浓度在280 nm处测得光密度(OD)0.40左右。
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