21年国自热点：中性粒细胞诱捕网，原来有这些中标项目，先睹为快
学术查 218篇原创内容公众号依托单位2021项目中标名称项目类别中日友好医院rs13306575通过NCF2的基因调控中性粒细胞胞外诱捕网的形成影响SLE发病的机制研究面上华中科技大学TRPV4调控中性粒细胞胞外诱捕网（NETs）生成在心房颤动中的机制研究面上复旦大学RIPK-1调控中性粒细胞胞外诱捕网（NETs）介导聚乳酸可降解支架内血栓形成的机制研究面上复旦大学CA19-9-ITGA2-CXCR4功能轴上调中性粒细胞胞外诱捕网DNA导致胰腺癌侵袭转移的机制研究面上辽宁中医药大学基于肿瘤细胞－中性粒细胞－胞外诱捕网研究西黄丸对乳腺癌转移微环境的调控作用面上华西医院FPR1通过诱导中性粒细胞外诱捕网（NETs）形成影响肺鳞癌预后的机制研究青年中性粒细胞是体内固有免疫系统的主要成员之一，通过杀伤外来病原体来保护宿主，除了能够吞噬消灭病原体以外，中性粒细胞也能通过一种由颗粒蛋白和DNA构成的称作中性粒细胞胞外诱捕网(NETs)的结构来捕获病原体，总结近年来关于NETs的结构，产生及其生物学特性的研究进展，并设想NETs可能成为炎症和相关疾病治疗中新的研究靶点。浙江省中医药研究所于2021年6月19日发表在Phytomedicine ( IF 5.340 )上题为“Re-Du-Ning injection ameliorates LPS-induced lung injury through inhibiting neutrophil extracellular traps formation”的文章，即热毒宁注射液通过抑制中性粒细胞胞外陷阱的形成改善 LPS 诱导的肺损伤。
急性肺损伤 (ALI) 和急性呼吸窘迫综合征 (ARDS) 是危及生命的疾病，可能发生在严重的 COVID-19 患者中。热毒宁注射液（RDN）是一种中药制剂，已在临床上用于治疗包括COVID-19在内的呼吸道疾病。该项研究发现RDN 通过抑制 MAPK 通路来抑制 NETs 的形成，从而改善 LPS 诱导的 ALI。
1、来自 RDN 的化合物的 HPLC 分析1 ml 热毒宁的 HPLC 分析显示这些成分：0.34 mg 山芝苷、0.38 mg 京尼平酸、2.51 mg 新绿原酸、5.88 mg 绿原酸、2.60 mg 隐绿原酸、0.81 mg 京尼平-1-O-β-D -龙胆二糖苷、3.66 mg 环藻酸、0.19 mg 咖啡酸、10.07 mg 栀子苷、1.32 mg secoxyloganin、0.54 mg 异绿原酸 B、0.25 mg 异绿原酸 A 和 0.37 mg 异绿原酸 C（图 1A）。热毒宁化合物的主要检测结构如图1B所示。
图12、RDN注射改善LPS诱导的肺损伤并提高小鼠的存活率为了评估 RDN 注射对肺的体内影响，作者使用了 LPS 诱导的急性肺损伤模型（图 2A）。与 LPS 组相比，RDN 显著提高了小鼠的存活率（图 2B）。肺组织学研究还表明，RDN 的给药减少了支气管周围和血管周围的白细胞浸润（图 2C、D）。这些数据表明 RDN 可以改善 LPS 诱导的急性肺损伤。
图23、RDN注射抑制炎症细胞浸润在 C57BL/6 中施用 LPS 24 小时可引起严重的急性肺部炎症，从而导致 BALF 细胞（T 细胞、巨噬细胞和中性粒细胞）数量增加。然而，RDN 导致 T 细胞（图 3A、E）、中性粒细胞（图 3B、F）、巨噬细胞（图 3C、G）和总细胞数（图 3D）显著且呈剂量依赖性减少。
图34、RDN注射改善肺部炎症为了探索炎性细胞因子的影响，作者检测了血浆和 BALF 中的典型细胞因子，如 IL-1β、IL-6、TNF-α、IL-17A 和 GM-CSF。LPS 组在血清和 BALF 中显示出显著高水平的炎性细胞因子。然而，与 LPS 组相比，RDN 的给药有效地降低了细胞因子的水平（图 4A、B）。LPS攻击后IL-1β、IL-6和TNF-α等细胞因子的mRNA表达显著升高。RDN 以剂量依赖性方式减少这些细胞因子（图 4C）。
图45、RDN 注入减少了 NET 的释放NETs 形成可发生在 LPS 诱导的小鼠模型肺损伤中。通过用氯脒和 GSK484（两种 PAD4 抑制剂）治疗小鼠来抑制 NETosis。Cl-脒和 GSK484 组显著减轻了肺组织的炎症病理变化（图 5A）。测量血清、BALF 和肺组织中 NE 和 MPO 的水平，发现它们在 RDN 治疗后显著降低（图 5B、C）。对肺切片进行免疫荧光染色，观察到 RDN 组的 NET 形成比 LPS 组减少（图 5D）。蛋白质印迹分析显示，与小鼠注射 LPS 相比，RDN 给药后 PAD4 的蛋白质水平降低（图 5E）。
图56、药物-靶点、疾病-靶点和靶点-通路网络分析从 TCMSP 和 DrugBank 数据库中收集总共获得了249个RDN相关靶标。 从GeneCards数据库中收集与急性肺损伤相关的靶点条目，获得1608个靶点。结果，在 RDN 和急性肺损伤的靶标之间重叠部分有 171 个靶标（图 6A）。图 6B显示了一些典型的靶标，例如 PADI4 等。通过 KEGG 通路富集分析了 171 个相互靶标（图 6C）。
图67、RDN注射通过MAPK途径抑制NETs的形成PADI4 (PAD4) 在 NETosis Papayannopoulos期间存在于 ROS 和钙信号的下游。因此，作者推测 RDN 及其代表性化合物可能调节 NETs 的形成。为了验证这一假设，我们使用了 PMA 诱导的 NETs 形成，然后测量了 MPO。来自 Lonicera japonica Thunb 的 Secoxyloganin和来自青蒿的东莨菪碱以剂量依赖性方式明显抑制 MPO 的表达（图 7A、B）。RDN可能通过MAPK途径抑制NETs的形成（图6C）。发现 secoxyloganin 抑制了 ERK1/2 的磷酸化（图 7C、D）。
图7国自热点的中标数统计如下：热点2021年医学部中标数热点2021年医学部中标数免疫调节852缺氧、低氧211血管生成、重构531泛素化186线粒体485乙酰化135外泌体430细胞焦亡118miRNA413代谢重编程118干细胞371单细胞105lncRNA371内质网76细胞自噬358炎性小体76肠道菌群312类器官46circRNA287超级增强子25m6Am5Cm7G270相分离21铁死亡257乳酸化修饰21转录调控232迁移体4
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