抗肿瘤药物的筛选办法，及主要用到的实验方法

细胞水平的细胞增殖是生物医学领域非常重要的表型，对细胞增殖的检测是检验药物对肿瘤细胞影响的zui主要检测手段。作为细胞水平检测增殖现象的传统方法，cck8比色法，Edu细胞增殖检测在细胞增殖检测中被广泛应用。

一、传统的肿瘤治疗方法

1.外科手术治疗

2.放射线治疗

3.化学药物治疗

众所周知，化疗会产生很多不良反应，比如：骨髓抑制(血细胞减少)、胃肠道反应、脱发、发热、皮疹、心脏毒性、肝脏毒性、神经毒性、泌尿道毒性、局部静脉炎、致畸、致突变、致癌等等。那么持续不断地寻找更好的抗肿瘤药物势在必行。

天然产物在新药及新药先导化合物的发现中起着不可替代的作用，是结构新颖和作用独特的抗肿瘤化合物的重要来源。美国国立癌症研究所(NCI)从1955年开始从天然产物中筛选抗肿瘤药物。目前世界上被批准广泛使用的抗肿瘤药物中,50 %以上来源于天然产物。那么问题来了~

如何进行抗肿瘤药物的筛选？ 以及主要用到哪些实验方法？

实际上，抗肿瘤药物的筛选体系复杂，涉及到宏观到微观水平的一系列实验。在这里小编，就简要梳理一下抗肿瘤筛选的关键流程吧：

二、动物水平的筛选流程：

三、细胞水平的筛选

①抑制肿瘤细胞增殖实验

②诱导肿瘤细胞分化实验

③诱导肿瘤细胞凋亡实验

④抗肿瘤血管生成实验

⑤肿瘤多药耐药性逆转实验

⑥抗肿瘤侵袭和转移实验

⑦诱导肿瘤细胞自噬实验

四、抑制肿瘤细胞增殖实验

细胞水平检测增殖现象的传统方法主要有：1）cck8比色法；2）Edu细胞增殖检测；

1）cck8比色法

CCK8是基于WST-8的一种细胞增殖检测方法，WST-8是一种水溶性四唑盐，常用于评估细胞的代谢活性。在中性pH值及中间电子受体存在的情况下，被细胞线粒体中的脱氢酶还原为具有高度水溶性的蓝/紫色甲臜产物（formazan）。生成的甲臜物的数量与活细胞的数量成正比。用酶联免疫检测仪在450nm波长处测定其光吸收值，可间接反映活细胞数量。该方法已被广泛用于一些生物活性因子的活性检测、大规模的抗肿瘤药物筛选、细胞增殖试验、细胞毒性试验以及药敏试验等。

2）Edu细胞增殖检测

如果你需要获取更直观和准确的细胞增殖数据，那么就用Edu细胞增殖检测法。EdU细胞增殖检测可以直接并准确地检测出新DNA的合成。这种检测不仅能够测定单个细胞的增殖，还可以通过任何平台检测出细胞、组织或整个有机体中的增殖细胞。EdU细胞增殖方法简单，灵敏，方便，快速，准确，无需DNA变性，能够与各种抗体或荧光蛋白同时标记，以检测细胞其他性状特征，是细胞增殖检测的zui佳选择。

Hela细胞Edu细胞增殖检测结果，蓝色荧光为DAPI染色的细胞核，红色荧光为EdU标记的增殖细胞；（细胞增殖成像分析试剂盒（EdU法）(橘红色荧光),cat#KTA2031,Abbkine）

文章来源：Abbkine