实验室做校准曲线，这17个问题必须要注意

做好校准曲线，要注意的17个问题

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仪器一定要校验好。这个不用说为什么了。

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移取液体体积要精确，保证迅速准确，尽可能用一根移液管；

为减小人为误差，同一种液体要一个人操作。

3

保证标准品的纯度，所用标准品最好是新打开的，纯度较高的固体或溶液，防止污染。

4

容器要保证洁净。公众号[实验室ISO17025]提醒你，容器保持清洁有时甚至比其他方面更重要，千万不要忽略。

5

根据标准品理化性质注意加样的先后顺序。

6

如果要测OD值，应保证测前各管液体充分混匀。

8

若多次测试，有某个点误差较大，应舍弃。

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样品的浓度等指标是根据标准曲线计算出来的，所以首先要把做标准曲线看作是比做正式实验还要重要的一件事，否则后面的实验结果无从谈起。

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设置标准曲线样品的标准浓度范围要有一个比较大的跨度，并且要能涵盖你所要检测实验样品的浓度，即样品的浓度要在标准曲线浓度范围之内，包括上限和下限。而对于呈s型的标准曲线，尽量要使实验样品的浓度在中间坡度最陡段，即曲线几乎成直线的范围内。

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最好采用倍比稀释法配制标准曲线中的标准样品浓度，这样就能够保证标准样品的浓度不会出现较大的偏离。

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检测标准样品时，应按浓度递增顺序进行，以减少高浓度对低浓度的影响，提高准确性。

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标准曲线的样品数一般为7个点，但至少要保证有5个点。

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做出的标准曲线相关系数因实验要求不同而有所变动，但一般来说，相关系数r至少要大于0.98，对于有些实验，至少要0.99甚至是0.999。

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标准曲线需要人为的增加（0,0）点吗？

不能增加。

通常的标准系列多是配制0,1,2,3mg/L系列这样的说法，没做实验人为添加（0,0）很不妥，因为很多时候0管进入仪器可能也有响应值，这也是我们考察试剂空白的一个重要步骤。这个0管在某些时候非常重要，如，全血铅测定，我们采用牛血清来基体匹配标准系列，如果此时你用酸做空白或没做实验人为添加（0,0），那你就很难做好标准曲线，所以，标准曲线的0管也是做好标准曲线的重要考虑点。

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标准曲线需要减掉试剂空白来做吗？

不需要。

仪器测出来标准系列的响应值可以减掉试剂空白或减掉0管的响应值来做，工作中我们也常用0管来做仪器调零。其实没有必要那么麻烦，即使空白或0管有响应值，在构建标准曲线时，我们已经认为该响应值就是0浓度，也就是扣除了这个空白的。

转自：实验室ISO17025