基因敲入细胞株技术介绍

基因敲入细胞系技术背景

基因敲入(KI)是指将外源性基因通过同源末端重组的方式插入到基因组中,使其在细胞内稳定表达的一种基因编辑技术。KI的外源基因可以是具有蛋白表达功能的编码基因,可以是参与基因调控的DNA元件,也可以是一段没有功能的DNA序列。

相比于基因敲除(KO),在设计KI的实验方案时需考虑的影响因素更多,如敲入基因片段的长短、同源重组效率等,且不同细胞系之间的基因敲入效率差异很大,这也使得KI的技术难度更高。

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