Python从零开始第五章生物信息学①提取差异基因

目前来说，做生物信息学的人越来越多，但是我觉得目前而言做生信的主要有三类人：老本行是做实验的，做生信可能是为了辅助研究或者是为了发paper（有非常多的临床生选择趟生信这波水）主要是做生信的，主要涵盖高通量测序数据分析，组学数据分析等等，专门从事生物学数据分析的这群人，其大部分也是本科生物狗作为强大的生力军，以调包写R，python为主。那么这群人就要熟悉看各种包的tutorial以及如何进行常规的数据的处理和分析等等。那么其实这群人，我个人认为对python的编程要求不是很高，在coursera先上两门课程，然后照着参考书在项目中练练就熟络了。也是做生信的，但是主要以写包为主，什么意思？就是以开发算法供给第二类人用，做这部分工作的人需要具有良好的数理基础，所以一般大部分都是本科属于物理，数学等理工科的人在做这部分工作。当然对编程也提出较高要求。我入门生物信息学是通过R语言入门的，但是接触到了python，这个也是目前用户数量数一数二的语言。python去做生信得优点是①过程更加直观，因为常见的R包功能一般已经封装好了，直接应用就可，虽然足够简单友好，但是不利于长期学习②基因组数据一般比较大，python速度一般比R快。下面我就记录一个通过python做生信分析的流程。使用的数据集是GSE5583，来自于2006年的基因芯片结果，该芯片目的是提取野生型和HDAC1小鼠胚胎干细胞用于Affymetrix微阵列上的差异RNA。导入包%clear%reset -f# In[*]import seaborn as snsimport matplotlib.pyplot as plt%matplotlib inlineimport osimport numpy as npimport pandas as pdos.chdir('D:\\train')from scipy import stats导入数据# In[*]data = pd.read_table("http://ahmedmoustafa.io/notebooks/GSE5583.txt", header = 0, index_col = 0)data.head()Out[27]: WT.GSM130365 WT.GSM130366 ... KO.GSM130369 KO.GSM130370100001_at 11.5 5.6 ... 36.0 42.0100002_at 20.5 32.4 ... 14.4 22.9100003_at 72.4 89.0 ... 130.1 86.7100004_at 261.0 226.2 ... 447.3 288.1100005_at 1086.2 1555.6 ... 1365.9 1436.2每一行是一个基因，每一列是一个样本，这也是比较经典的芯片数据集查看数据维度# In[*]# Check the dimension of the loaded data (rows & columns)data.shape(12488, 6)# In[*]# Number of rowsnumber_of_genes = len(data.index)print(number_of_genes)12488总共12488个基因，6个样本。标准化这一步是标准化，使用的是常见的log2（）标准化# In[*]data2 = np.log2(data+0.0001)data2.head()Out[30]: WT.GSM130365 WT.GSM130366 ... KO.GSM130369 KO.GSM130370100001_at 3.523575 2.485453 ... 5.169929 5.392321100002_at 4.357559 5.017926 ... 3.848007 4.517282100003_at 6.177920 6.475735 ... 7.023478 6.437962100004_at 8.027907 7.821456 ... 8.805099 8.170426100005_at 10.085074 10.603256 ... 10.415636 10.488041绘制盒须图# In[*]# Boxplot of each microarrayplt.show(data2.plot(kind = 'box', title = 'GSE5583 Boxplot', rot = 90))

这一步目的是查看不同样本之间是否有总体差异。# Densityplt.show(data2.plot(kind = 'density', title = 'GSE5583 Density'))

可以看出样本之间没有总体差异，可以做差异分析。# In[*]# The mean of expression of the wt samples for each gene (row)wt = data2.loc[:, 'WT.GSM130365' : 'WT.GSM130367'].mean(axis = 1)wt.head()# In[*]# The mean of expression of the ko samples for each gene (row)ko = data2.loc[:,'KO.GSM130368':'KO.GSM130370'].mean(axis = 1)ko.head()查看基因差异的差异倍数fold分布# In[*]fold = ko - wt# Histogram of the fold-changeplt.hist(fold)plt.title("Histogram of fold-change")plt.show()

查看基因差异的P值分布from scipy import statspvalue = []for i in range(0, number_of_genes): ttest = stats.ttest_ind(data2.ix[i,0:3], data2.ix[i,3:6]) pvalue.append(ttest[1])# Histogram of the p-valuesplt.hist(-np.log(pvalue))plt.title("Histogram of p-value")plt.show()