如何打出漂亮的核磁图谱，有哪些注意细节？
在各种各样的化学分析仪器中， 核磁共振谱仪被公认为是一种非常重要的研究和测试工具， 它的许多功能是其它手段无法代替的。1945年Bloch和Purcell分别领导两个小组同时独立地观察到核磁共振（NMR），二人因此荣获1952年诺贝尔物理奖。历经半个多世纪，NMR已从最初发现到最终发展成为成熟的医用的MRI影像学检测手段，期间6次被授予诺贝尔奖（物理、化学、生理／医学），堪称史上获奖次数最多的技术。
与NMR有关的诺奖
自1953年出现第一台核磁共振商品仪器以来，核磁共振在仪器、实验方法、理论和应用等方面有着飞跃的进步。谱仪频率已从30MHz发展到1100MHz。谱图已从一维谱到二维谱、三维谱甚至更高维谱。所应用的学科已从化学、物理扩展到生物、医学等多个学科。总而言之，核磁共振已成为最重要的仪器分析手段之一。
NMR常用内标物
氢谱：非水溶剂四甲基硅烷（TMS）水溶液为2,2-二甲基戊硅烷-5-磺酸钠(ＤＳＳ)
碳谱：四甲基硅烷（ＴＭＳ）或者氘代试剂中的碳峰
TMS优点：
TMS分子中12个1H处于完全相同的化学环境，只产生一个尖峰，少量的TMS即可测出NMR信号；屏蔽强烈，共振吸收峰位于谱图最右端。与有机化合物中的1H峰不重叠；化学惰性；易溶于有机溶剂；沸点低（27℃），样品易回收。
硼谱：乙醚三氟化硼或者三甲氧基硼
磷谱：８５％磷酸（但只能作为外标）
锂谱：４Ｍ高氯酸锂溶液
钠谱：1M氯化钠溶液
硅谱：四甲基硅烷，但在低频区则用四乙基正硅酸酯
NMR常用同位素核有关物理参数
a 磁旋比的单位是107弧度/特斯拉/秒
b 共振频率以1H频率为100MHz作参考
c 检测灵敏度以1H为1作为参考，并考虑了同位素的天然丰度。
请大家记住：无论内标还是外标，实际化学位移值随温度变化而变化，而标准物本身就受温度的影响。如温度每改变30K，TMS质子共振信号将变化0.1 ppm。因此，如果做变温试验，最好标明详细的实验过程。
NMR常用同位素核有关物理参数
a 磁旋比的单位是107弧度/特斯拉/秒
b 共振频率以1H频率为100MHz作参考
c 检测灵敏度以1H为1作为参考，并考虑了同位素的天然丰度。
NMR所需样品量
在核磁共振实验中，样品的量控制也是一门学问，有的产品是多步合成的，很宝贵，例如全合成产品。对于氢谱，3到10毫克样品足够。对于分子量较大的样品，有时需要浓度更大的溶液。但浓度太大会因饱和或者粘度增加而降低分辨率。对于碳谱和杂核，样品浓度至少为氢谱的5倍（一般在20-500毫克左右）。
对于二维实验，为了获得较好的信噪比，样品浓度必须够。根据经验，25毫克样品足以完成所有实验，包括氢碳相关HMBC实验。如果样品只有1到5毫克，只能完成均核氢氢相关实验，是与碳相关的实验至少需要过夜。保持样品高度或者体积一致。这将减少换样品后的匀场时间。对于5毫米核磁管，样品体积应为0.6毫升或者样品高度为4厘米。
样品和样品管
样品：纯净，干燥，溶液内无灰尘或沉淀，尤其不应含有铁磁性杂质。特殊条件下需要过滤或除氧。黏度不要过高（影响驰豫时间），黏度越大，分辨率越差，样品可适度稀释来提高分辨率。
溶液内的灰尘会使谱线明显变宽而降低分辨率，再好的匀场也无法解决该问题。
样品管：匀质，清洁，不携带铁磁性物质。不要用洗液洗涤，以免带入很难除去的顺磁杂质。不要在温度太高的烘箱里直立烘太久。
样品管的直径：
5mm 最常用
3mm 用于样品量很少的样品
10mm 用于观测低灵敏度核或溶解度受限制的样品
溶液体积：
5mm probe 0.4-0.6ml
3mm probe 0.1-0.15 ml
样品管处于合适的高度，使样品处于磁场的最强且最均匀的部分。
足够的溶液高度，3.5～5cm。
对于5毫米核磁管，样品体积应为0.5毫升或者样品高度为4～4.5厘米。太低的溶液高度使匀场所需时间大大增加，而且很难得到高质量的谱图。不要为了增加浓度而过分缩小溶液的体积。
谱仪的磁场强度越高，仪器灵敏度也高，对于污染物、样品制备不好和不好的样品管的灵敏度也增加。
选择合适的氘代溶剂
谱议靠氘信号锁场和匀场，一般要求：惰性，低沸点，价格尽量便宜首要规则，氘代原子越多，价格越高。
溶解度：越大越好，以增加实验的灵敏度。
溶剂信号对样品的干扰：越小越好，尽量不与谱峰范围重叠。
温度可靠性：在实验温度下不会挥发或凝固，溶解度不会受太大影响。比如，D6-DMSO凝固点18.4度,如果实验室不是恒温的,冬天凝固很正常温度低会发生凝固。
粘滞性：粘滞性越小，分辨率越好
水含量：几乎所有核磁溶剂里都有痕量或更多的水，水的存在会降低谱图的质量。
带活泼氢的试样尽量选择不含活泼氢的试剂，避免该峰因氢氘交换而无 法在图谱中表现出来
适当的芳香氘代溶剂有可能简化图谱
首选溶剂：CDCl3，尖锐的单峰，7.26ppm，沸点 60.8°C，100ml ￥520
其它常见氘代溶剂：CD3COCD3，CD3OD，DMSO－d6（可以打出活泼氢），C5D5N
准备样品
1. 首要的是保证产物的纯度，杂质峰肯定让你的图不好看。
2. 拿住样品管是要拿住上部。
3. 实验过程中的溶剂残留也是影响图谱质量的很大因素。常见的有石油 醚、乙酸乙酯等溶剂。
4. 对于氢谱，3 到 10 毫克样品足够。对于分子量较大的样品，有时需要浓度 更大的溶液。但浓度太大会因饱和或者粘度增加而降低分辨率。
5. 对于碳谱和杂核 谱，样品浓度至少为氢谱的 5 倍（一般在 100 毫克左右）。
6. 对于二维实验，为了获得较好的信噪比，样品浓度必须够。根据经验，25 毫克样品足以完成所有实验，包括氢碳相关 HMBC 实验。如果样品只有 1 到 5 毫克，只能完成同核氢氢相关实验，与碳相关的实验至少需要过夜。保持样品高度或者体积一致。这将减少换样品后的匀场时间。对于 5 毫米核 磁管，样品体积应为 0.6 毫升或者样品高度为 4 厘米。
7. 保持样品高度或者体积一致。这将减少换样品后的匀场时间。
8. 盖上样品管，使用封口膜密封减少蒸发。
关于样品纯化
1. 过柱子，过柱子，重要的事情说三遍。再好分都过根柱子，过柱子的时候勤换瓶子，产物点分几瓶接，取中间的旋干送核磁。
2. 国内一般石油醚用的多一点，国外正己烷多一点，可以的话用正己烷，正己烷相对而言比较干净...
3. 旋蒸其实不能把溶剂全蒸完，可以考虑最后用真空泵抽一下，这样会使溶剂峰更低。二氯石油醚，那么抽个半小时就差不多没了；如果有乙酸乙酯，DMF，乙腈甲醇等沸点比较高的溶剂，先高温把溶剂旋干净，然后趁热抽，再常温抽几个小时，基本上溶剂峰就没了。水峰一般也比较容易抽没。
4. 注意潜在的油脂类杂质：如果东西比较少，处理的时候又不太注意，在氢谱上位移1.2和0.8会有两个油脂的杂峰，很影响美观。这种情况一般可以用石油醚洗两次产物，然后抽干，油脂大部分会被石油醚洗掉。
5. 氘代试剂平时可以放在干燥箱里，防止引入水分。
参考资料：
制备高质量液体核磁样品--核磁制样三要素，王巍 向俊锋
过柱心得参考知乎网友，封面来源知乎Qing。