基于数据挖掘及网络药理学方法初探毛丽军教授治抑郁症处方规律
毛丽军教授认为,失眠的根本病因病机是阳气常满,不得入于阴,故不眠。在临床工作中毛丽军教授多从临床症状论治,经验丰富,组方灵活,用药考究,见解独特,故将毛丽军教授治疗失眠的经验进行整理。...
研究目的:通过运用频数分析、聚类分析、关联分析等现代数据挖掘方法对毛丽军教授治疗抑郁症患者的中药处方做回顾性研究,系统整合出毛丽军教授辨证论治各证型的基础方剂、常用药对,解析相关用药经验,提高临床用药精确度;最后将数据挖掘得出的毛丽军教授治疗抑郁症核心组方药物通过网络药理学模式方法明确阐述其分子生物学机制。研究方法:1.按纳排标准严格筛选2018.10-2020.10期间毛丽军教授于中国中医科学院西苑医院门诊确诊为“抑郁状态”的用药处方,共851例。利用Office软件建立患者中药处方的数据库,进而采用IBM SPSS Statistic 25.0及SPSS Modeler 18.0软件对数据库进行患者描述性统计分析、聚类分析及关联规则分析。2.通过中药系统药理学分析平台TCMSP以及BATMAN-TCM数据库收集由数据挖掘部分研究所得
核心组方:
玫瑰花、郁金、香附、珍珠母、合欢皮5味中药发挥药效的活性成分,运用PharmMapper药效团数据库预测潜在靶标;通过GeneCards/OMIM数据库获取目前已知的与抑郁症相关的疾病靶点;进而利用R语言软件筛选出中药和抑郁症靶点的交集,制作韦恩图并利用Cytoscape 3.8.0软件构建蛋白质-蛋白质相互作用关系网络图,再根据Degree算法筛选核心靶点,最后利用R软件对核心靶点进行生物学过程富集分析与代谢通路富集分析。研究结果:1.从中医证型分布来看,辨证属心阴不足证234例,占比28%;肝肾阴虚证213例,占比25%;痰热扰神证197例,占比23%;肝郁气滞证130例,占比15%;心脾两虚证77例,占9%。从药物频数分布来看,使用频次和频率最高的
20味中药分别为珍珠母、郁金、香附、玫瑰花、合欢皮、首乌藤、柴胡、酸枣仁、牡丹皮、紫石英、生龙齿、当归、桅子、太子参、生地黄、玄参、陈皮、柏子仁、北沙参、茯苓;
主要是以理气、安神、滋阴三大类药物为主。
2.通过聚类分析结果,结合临床实际,明确5个证型基础方剂的药物组成为
:①肝郁气滞证:陈皮、柴胡、川芎、枳实、郁金、香附、玫瑰花、珍珠母、木香、厚朴、旋覆花、紫苏梗;②痰热扰神证:半夏、竹茹、胆南星、珍珠母、枳实、石菖蒲、远志、陈皮、茯苓;③心脾两虚证:党参、太子参、白术、茯苓、黄芪、酸枣仁、木香、当归、丹参、远志、茯神;④心阴不足证:太子参、玄参、北沙参、远志、茯神、麦冬、五味子、柏子仁、酸枣仁、首乌藤、合欢皮、生地黄、栀子、牡丹皮;⑤肝肾阴虚证:枸杞子、菊花、生地黄、山茱萸、山药、牡丹皮、泽泻、茯苓、女贞子、墨旱莲、当归、地骨皮、酸枣仁。
3.通过关联规则结果,结合临床实际,明确5个证型的常用关联药对为:
①肝郁气滞证:珍珠母-玫瑰花-香附-柴胡-郁金;②痰热扰神证:竹茹-郁金-柴胡-半夏;③心脾两虚证:黄芪/当归-木香-柴胡-白术;④心阴不足证:北沙参/五味子-玄参-酸枣仁-柏子仁;⑤肝肾阴虚证:生地黄-墨旱莲-女贞子-牡丹皮
。4.综合分析各证型基础方剂组成,并结合851张处方的总体药味频数统计,经毛丽军教授确认,明确最终核心组方药物定为:珍珠母、香附、郁金、玫瑰花、合欢皮。
5.通过网络药理学对核心药物干预治疗抑郁症进行分子生物机制分析:①核心药物主要活性成分:去甲肾上腺素(NE),番茄红素LYC,黄酮类槲皮素、柚皮素、木犀草素、山柰酚、异鼠李素等及生物碱类β-谷甾醇、豆甾醇等。②核心作用靶点:AKT1、TP53、MAPK1、CASP3、IL6、EGFR、TNF、ESR1、CCND1、EGF;类型为:转录因子、激酶、炎性因子、生长因子等。③GO富集分析结果:化合物靶点-抑郁症靶点经生物过程(biologcal process,BP)分析显示,关键靶点主要参与细胞化学应激反应、活性氧反应、氧化应激反应、无机反应、脂多糖反应等的调节。细胞组分(cellular component,CC)分析发现,靶蛋白主要在细胞膜、质膜蛋白复合物、受体复合体、膜面、囊泡腔、分泌颗粒腔、细胞质囊泡腔等进行调解。分子功能(molecularfunction,MF)分析显示,靶点主要参与蛋白激酶活性、RNA聚合酶Ⅱ特异性DNA结合转录因子、蛋白磷酸酶结合、磷酸酶结合、激酶调节活性、DNA结合转录因子结合、肽结合、蛋白激酶调节活性、泛素样蛋白连接酶结合、跨膜受体蛋白酪氨酸激酶活性等调节。④KEGG 富集分析结果:肿瘤、PI3K-Akt、AGE-RAGE、MicroRNAs、HIF-1、MAPK、C型凝集素受体等信号通路。综上所述:1.第一部分研究运用药物频次分析、聚类分析、关联规则等算法逐一进行数据挖掘,所得结果显示了毛丽军教授治疗抑郁症的临床辨治思路及用药处方规律:抑郁症多以阴虚为基本病机,阴血暗耗常为最终病理结果,治以滋阴养血健脾,疏肝养心安神为法;肝郁是抑郁症的一个病理过程,也是由始至终的病机,疏肝解郁法应贯穿整个疗程;新病者以健脾疏肝为主,久病者则以滋阴补血,养心安神为主。用药多以理气安神、滋阴清热几大类为主;郁病病程较缓,用药不宜峻猛。应同时注意补益心脾而不过燥,滋养肝肾而不过腻。2.第二部分研究运用网络药理学方法系统分析了毛丽军教授治疗抑郁症核心药物的分子机制,共获得65个活性成分及93个核心药物治疗抑郁症的靶点;其中较为关键的,可对抑郁症产生较大影响的活性成分包括去甲肾上腺素(NE),番茄红素LYC,黄酮类槲皮素、柚皮素、木犀草素、山柰酚、异鼠李素等及生物碱类β-谷甾醇、豆甾醇等。核心组方药物通过对核心靶点AKT1、MAPK1、IL6、TNF、EGF。及PI3K-Akt信号通路,MAPK信号通路,microRNA信号通路的有效调节从而治疗抑郁症。...