Cre/LoxP系统有哪些局限性？

尽管Cre/LoxP是常用的组织特异性基因编辑手段，它原理上带来的一些局限性也需要大家关注：

①脱靶效应（Off-Target Effects）：因为Cre/LoxP系统利用的是组织特异性启动子、增强子来缩窄表达Cre的范围，原理上就决定了可能的非特异性表达，需要注意；

②Cre的毒性（Toxicity of cre）：某种意义上来说，Cre重组酶的加入可以视作是基因组缺陷，影响了部分组织的存活能力，也有研究显示了它的潜在成瘤性；

③剪切不完全（incomplete excision of floxed loci）：可能与待剪切的DNA片段的长度有关，这一点主要在诱导性Cre系统中有所表现；

④组织器官特异性而非细胞特异性：无法准确到某一特定细胞类型进行基因编辑。