茄病镰刀菌导致的外伤感染检验分享

【前  言】

茄病镰刀菌在临床感染的微生物检验中比较少见，我有幸在日常检验工作中遇到一例茄病镰刀菌导致的外伤感染，与检验同行分享，希望对检验同行有所帮助。

【案例经过】

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患者，男，58岁。因“不慎被打地机打伤头面部、双上肢疼痛、流血3小时”于2019年10月12日21:10:00送入院就诊，门诊检查后以“头面部及双上肢外伤”收住骨科。

患者受伤以来，神清，精神差，疼痛面容。

查体：T：36.2℃，P：108次/分，R：21次/分，BP：120/70mmHg。

2019年10月13日生化检验、免疫、凝血检验基本正常.

血常规

WBC：12.73×10⁹/L

NEUT%：77.80%

RBC：4.27×10¹²/L

PLT：327×10⁹/L

CRP：17.3㎎/L（≤6）

D-Di：1.50㎎/L（≤0.55）

PCT：0.35ng/ml（≤0.5）

患者右侧眉弓可见一长约4cm伤口，伤口少量流血，查看伤口深，可见泥沙状异物存留，颅骨外露。

右手背可见直径4cm×5cm皮肤软组织及肌腱毁损伤口，伤口内可见大量泥沙状异物存留，探查伤口，可见肌肉、软组织、肌腱部分缺失，指骨外露；

左手小指可见一长约3cm皮肤挫裂伤口，伤口内可见大量泥沙状异物存留，伤口少量流血。

骨科医生进行肌腱吻合术、手外伤返取皮回植、关节囊修补术，头面部外伤清创缝合术。

2019年10月17日患者诉双上肢肿胀、疼痛、活动受限较前有所缓解；右侧眉弓伤口敷料干燥，查看伤口轻微发红，伤口周围肿胀较前稍微有所消退；触痛明显，右手伤口敷料可见被少量血性液渗湿，未更换，查看伤口轻微发红，伤口周围轻微肿胀，触痛明显；左手可见伤口周围轻微发红肿胀，触痛明显，左手桡动脉可触及；左手小指伸指功能受限，屈指功能正常。

2019年10月17日17:30骨科医生送检伤口分泌物致检验科微生物室进行细菌培养和鉴定。

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检验科2019年10月17日20:44接收标本，21:07进行培养。

2019年10月19日09:00培养结果见图一。

图一  伤口分泌物纯培养36h，中间微白色，周围黑色嵌入血平板

当时看见血平板生长情况，麦康凯平板无生长。

用生理盐水涂片作湿片观察：见真菌孢子（是小分生孢子）和少许菌丝。当时转种CANA念珠菌显色平板和MH平板两组（因为科室无察氏培养基，选择MH平板替代），一组放35℃培养，另一组放室温23℃培养。

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血平板继续培养至2019年10月22日09:00共计108h，结果如图二：周围灰色，中间黄色菌落。

图二  伤口分泌物纯血平板培养108h，中间黄色，周围黑色嵌入血平板

茄病镰刀菌在CANA念珠菌显色平板和MH平板培养72h生长情况如图三、四、五：

（1）在35℃培养条件下显色培养基的背面显深绿色；在23℃显色培养基背面显浅绿色。

（2）CANA念珠菌显色平板正面为周边白色羽绒样，中心淡黄色气生菌丝；MH平板正面为周边白色羽绒样，中心依然白色向下沉降，整个菌落似油煎蛋样或同心圆状。

图三 茄病镰刀菌转种培养72h生长情况

图四  茄病镰刀菌在CANA念珠菌显色培养72h平板生长情况

图五  茄病镰刀菌在MH平板培养72h平板生长情况

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茄病镰刀菌白色气生菌丝进行乳酸酚棉蓝染色结果见图六：见大量特征性大分生孢子。

图六  茄病镰刀菌大分生孢子乳酸酚棉蓝染色结果×1000倍

【案例分析】

镰刀菌隶属于真菌界，有性期隶属于子囊菌门，粪壳菌纲，肉座菌目，肉座菌科；无性期隶属于半知菌类，丝孢纲，丝孢目，瘤座孢科。

常见引起人类感染的镰刀菌主要有茄病镰刀菌、串珠镰刀菌、尖镰刀菌、厚垣镰刀菌和半裸镰刀菌等。

镰刀菌属菌种镜下可见透明分隔菌丝、分生孢子梗、瓶梗和大小分生孢子。大分生孢子粗壮、壁厚、光滑，大小为(3~8)um×(11~70)um，呈镰刀形至纺锤形，远端尖,有2~5甚至7个分隔，以3隔居多。

该属菌种在25℃下孵育，在PDA培养基上，气生菌丝生长良好，棉絮状、低平，或蛛丝状、稍高。培养初期多为白色绒毛状菌落，后期呈白、褐、黄、蓝、绿色或它们之间的颜色转换。在SDA培养基上生长迅速，菌落扩展,较快转为灰绿色^[1]。

对于免疫力正常的患者，外伤或外来异物导致皮肤或粘膜破损是镰刀菌感染的主要途径，感染一般较局限^[2]。

该患者无其他传染病史，免疫力正常。无透析史、糖尿病史。有外伤史（右侧眉弓可见泥沙状异物存留；右手背伤口内可见大量泥沙状异物存留；左手小指伤口内可见大量泥沙状异物存留，伤口少量流血），说明该患者病原体来自劳作时的土壤中泥沙状异物。

而茄病镰刀菌广泛存在自然环境中。外伤后5天患者伤口明显红肿，分泌物分离培养菌种为纯培养。茄病镰刀菌最终确定为该患者病原菌。

【小  结】

微生物检验一定要结合临床，明辨是非。加上细心、耐心、认真负责的工作。才能让病原菌无处藏身，遇到不认识的一定要查阅资料。如该例患者茄病镰刀菌的感染就要考虑外伤这一情况。

【参考文献】

[1]陈东科，孙长贵.实用临床微生物学检验与图谱[M].1版.人民卫生出版社,2011:649-650.

[2]杨青，朱建国.镰刀菌和镰刀菌感染[J]浙江检验医学,2010,8(2):16-18.

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编辑：徐少卿   审校：陈雪礼