肥大细胞(甲苯胺蓝)染色液的染色步骤
产品简介:肥大细胞(Mast cell)是疏松结缔组织内常见的细胞,常成群的沿着小血管和淋巴管分布,也常见于支气管和胰腺的小叶间导管周围,一般细胞较大,直径约为20-30μm,呈圆形或椭圆形,胞核较小、胞质内充满粗大且具有异染性嗜酸性颗粒。
甲苯胺蓝(Toluidine Blue O)中的阳离子有染色作用, 组织细胞的酸性物质与其中的阳离子相结合而被染色。甲苯胺蓝还含有两个助色团,能促使染料产生电离成盐类, 帮助发色团对组织产生染色力, 使切片上的组织细胞着色,可染细胞核使之呈蓝色。肥大细胞颗粒呈紫红色,其他呈蓝色。
操作步骤
取新鲜组织立即固定于10%中性福尔马林固定液中,常规脱水包埋。
切片厚度4-5μm,常规脱蜡至水。
系列乙醇各1min,自来水洗2min。
入Toluidine Blue O Stain,浸染15~30min。
自来水稍洗。
TBO分化液分化,直至细胞核和颗粒清晰,可在显微镜下控制。
自来水稍洗,滤纸吸干或吹风机吹干水分。
95%乙醇1min,无水乙醇2次,每次2min。
二甲苯透明,中性树胶封固。
染色结果:肥大细胞颗粒 紫蓝色;背景 淡蓝色
注意事项:
针对于胃粘膜组织、软骨组织等较难着色组织的染色,浸染于甲苯胺蓝染色液的时间应相应延长。
应注意组织要新鲜,取出后立即固定。
甲苯胺蓝染色后不宜采用低浓度乙醇脱水,否则容易导致褪色。
分色后应快速入95%乙醇、无水乙醇、二甲苯的时间不宜过久,否则容易导致褪色。
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小编zzj 2021.1.22