核Dicer-环状RNA复合体推动胶质母细胞瘤细胞微RNA体的解除管制

小燕子

论文：The nuclear DICER–circular RNA complex drives the deregulation of the glioblastoma cell microRNAome

摘要

各种各样的细胞microrna(“microRNAome”)是细胞稳态的重要读数，但调控microRNAome的机制尚不清楚。与正常大脑相比，胶质母细胞瘤的microRNAome显著下调。在这里，我们发现胶质母细胞瘤microRNAome转录后成熟的故障，并将其与DICER的异常核定位联系起来，DICER是负责microRNA成熟的主要酶复合物。DICER的核相互作用组分析显示，复合物中存在RNA结合蛋白RBM3和环状RNA circ2082。针对这个复杂的击倒circ2082结果恢复胞质定位的帽子和普遍microRNAome脱抑制,导致transcriptome-wide重组,减少胶质母细胞瘤细胞的致瘤性体外和体内有利的胶质母细胞瘤患者预后的相关性。这些发现揭示了恶性细胞中微小rna组解除控制的机制基础。

结果

胶质母细胞瘤微RNA体的表达被抑制

🔺 Fig.1 在胶质母细胞瘤和GSCs中，微RNA小体受到抑制，但不是前体。

在胶质母细胞瘤细胞中，二聚体定位于细胞核，而不是胞浆。

🔺 Fig. 2 Dicer保留在GSCs的核内，与RBM 3蛋白形成复合物。

RBM 3是核的一个相互作用的伙伴，而不是胞浆二分器。

Circ 2082是一种在癌症中高表达的圆环RNA，它与RMB 3结合，是核子Dicer复合体的一部分。

🔺 Fig. 3 Dicer/RBM 3与大约2082.

Cyc2082基因敲除导致Dicer定位于胞浆的正常化与微RNA体稳态的重建

🔺 Fig. 4 击倒大约2082结果GSC微RNA小体广泛表达。

循环2082击倒有抗癌作用

🔺 Fig. 5 击倒大约2082减轻GSCs的致瘤性

circ2082基因敲除的临床意义

🔺 Fig. 6 依赖circ2082的足迹是通过microRNAome的重排来介导的。

材料和方法

细胞培养、细胞转染、质粒、细胞质/核分馏、 蛋白质纯化、定量PCR、免疫沉淀、RNA IP、RNA反义纯化、Western blotting、单分子荧光原位杂交、免疫荧光、体外细胞试验、人体组织加工、动物研究、RNA克隆与测序、基因微阵列、圆环RNA微阵列、阵列数据分析、计数法、质谱蛋白质组学、TCGA数据分析、量化与统计分析

END

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