高中生物常见试剂及变色反应大全,学霸都在看!
高中生物常见试剂大全
1.斐林试剂:成分:0.1g/ml NaOH(甲液)和0.05g/ml CuSO4(乙液)。用法:将斐林试剂甲液和乙液混合,再将混合后的斐林试剂倒入待测液,水浴加热,如待测液中存在还原糖,则呈砖红色。
2.班氏糖定性试剂:为蓝色溶液。和葡萄糖混合后沸水浴会出现砖红色沉淀。用于尿糖的测定。
3.双缩脲试剂:成分:0.1g/ml NaOH(甲液)和0.01g/ml CuSO4(乙液)。用法:向待测液中先加入2ml甲液,摇匀,再向其中加入3~4滴乙液,摇匀。如待测中存在蛋白质,则呈现紫色。
4.苏丹Ⅲ:用法:取苏丹Ⅲ颗粒溶于95%的酒精中,摇匀。用于检测脂肪。可将脂肪染成橘黄色(被苏丹Ⅳ染成红色)。
5.二苯胺:用于鉴定DNA。DNA遇二苯胺(沸水浴)会被染成蓝色。
6.甲基绿:用于鉴定DNA。DNA遇甲基绿(常温)会被染成蓝绿色。 吡罗红:检测RNA,呈红色
7、50%的酒精溶液:用于洗去苏丹Ⅲ在脂肪上的浮色。
8、70%的酒精溶液:用于医学临床上的消毒灭菌。
9、95%的酒精溶液:DNA不溶于酒精,尤其是体积分数为95%的冷冻酒精,而细胞中的某些物质可以溶解于酒精
10、15%的盐酸:和95%的酒精溶液等体积混合可用于解离根尖,使细胞分离开来。“有丝分裂观察”和“低温诱导染色体加倍”中15%盐酸能够使洋葱细胞的细胞壁软化,并使细胞间的中胶层物质溶解,从而达到分离细胞的目的。洗去卡诺氏液
8%盐酸:(1) 盐酸能改变细胞膜的通透性,加速染色剂的跨膜运输; (2)盐酸使染色体中的DNA与蛋白质分离,便于DNA与染色剂的结合
11. 龙胆紫溶液或醋酸洋红:碱性染料,用于染色体染色时,前者呈深蓝色,后者呈红色 改良苯酚品红染液:检测染色体,红色 健那绿:检测线粒体,专一性让线粒体染色呈蓝绿色
12.20%的肝脏、3%的过氧化氢、3.5%的氯化铁:用于比较过氧化氢酶和Fe3+的催化效率。(新鲜的肝脏中含有过氧化氢酶)
13、3%的可溶性淀粉溶液、3%的蔗糖溶液、2%的新鲜淀粉酶溶液:用于探索淀粉酶对淀粉和蔗糖的作用实验。
14.碘液:用于鉴定淀粉的存在。遇淀粉变蓝。遇糖原变红
15.丙酮:用于提取叶绿体中的色素
16.层析液:(成分:20份石油醚、2份丙酮、和1份苯混合而成,也可用93号汽油)可用于色素的层析,即将色素在滤纸上分离开。
17.二氧化硅:在色素的提取的分离实验中研磨绿色叶片时加入,可使研磨充分。
18.碳酸钙:研磨绿色叶片时加入,可中和有机酸,防止在研磨时叶绿体中的色素受破坏。
19、0.3g/mL的蔗糖溶液:相当于30%的蔗糖溶液,比植物细胞液的浓度大,可用于质壁分离实验。
20、0.1g/mL的柠檬酸钠溶液:与鸡血混合,防凝血
21、氯化钠溶液:①可用于溶解DNA。当氯化钠浓度为2mol/L、 0.015mol/L时DNA的溶解度最高,在氯化钠浓度为0.14 mol/L时,DNA溶解度最低。②浓度为0.9%时可作为生理盐水。
22、胰蛋白酶:①可用来分解蛋白质。②可用于动物细胞培养时分解组织使组织细胞分散于。
23、秋水仙素:人工诱导多倍体试剂。用于萌发的种子或幼苗,可使染色体组加倍,原理是可抑制正在分裂的细胞纺缍体的形成。
24、氯化钙:增强细菌细胞壁的通透性,可用于基因工程。
25.石磊试剂:检验溶液酸碱性→判断光合速率与呼吸速率快慢的关系
26、NaHCO3/ Na2CO3 Na2HPO4/ NaH2PO4:酸碱缓冲对→调节PH
27.NaCl:配制生理盐水(0.9%)或用于提取DNA(0.14M或2M)
28.溴麝香草酚蓝水溶液:检测CO2,由蓝变绿再变黄 常用的实验方法
29.卡诺氏液:低温诱导染色体数目加倍(固定细胞形态)
化学物质的检测方法
1、淀粉————碘液
2、麦芽糖———斐林试剂
3、CO2————Ca(OH)2
4、乳酸————石蕊试剂
5、O2 ————熄灭、复燃
6、蛋白质——双缩脲反应
实验结果的显示方法
1.光合速度——CO2吸收量
2.呼吸速度——O2消耗量
3.原子途径——同位素示踪法
4.细胞液浓度大小——质壁分离和复原
5.细胞是否死亡——质壁分离的复原
6.甲状腺激素作用——饲喂法
7.生长素作用——向光性
8、胰岛素作用—切除、移植胰腺
实验条件的控制方法
1、增加水中氧气——增加水生植物、通O2
2、减少水中氧气——减少水生植物、通N2
3、除去容器中的CO2——NaOH
4、除去叶中原有的淀粉——暗处理
5、除去叶中叶绿素——脱色处理
6、除去光合对呼吸的干扰——遮光处理
7、如何得到单色光——棱镜折射
8、血液抗凝——加柠檬酸钠
试剂 |
检测物质 |
反应颜色 |
斐林试剂(水浴加热) |
还原糖 |
砖红色沉淀 |
双缩脲试剂 |
蛋白质 |
紫色 |
苏丹三/四 |
脂肪 |
橘黄色/红色 |
碘 |
淀粉 |
蓝色 |
二苯胺(沸水加热) |
DNA |
蓝色 |
甲基绿 |
DNA |
绿色 |
吡罗红 |
RNA |
红色 |
健那绿(活体染色剂) |
线粒体 |
蓝绿色 |
龙胆紫/醋酸洋红 |
染色体 |
紫色/红色 |
酸性重铬酸钾 |
乙醇 |
由橙色变灰绿色 |
溴麝香草酚蓝水溶液 |
二氧化碳 |
由蓝变绿再变黄 |
高考生物颜色反应汇总,必背!
1、斐林试剂检测可溶性还原糖原理:
还原糖斐林试剂→砖红色沉淀
注意:斐林试剂的甲液和乙液要等量混合均匀后方可使用,而且是现用现配,条件需要水浴加热。
应用:检验和检测某糖是否为还原糖;不同生物组织中含糖量高低的测定;在医学上进行疾病的诊断,如糖尿病、肾炎。
2、苏丹Ⅲ、苏丹Ⅳ检测脂肪原理:
苏丹Ⅲ脂肪→橘黄色;苏丹Ⅳ脂肪→红色
注意:脂肪的鉴定需要用显微镜观察。
应用:检测食品中营养成分是否含有脂肪。
3、双缩脲试剂检测蛋白质
原理:蛋白质双缩脲试剂→紫色
注意:双缩脲试剂在使用时,先加A液再加B液,反应条件为常温(不需要加热)。
应用:鉴定某些消化液中含有蛋白质;用于劣质奶粉的鉴定。
4、碘液检测淀粉原理:淀粉碘液→蓝色
注意:这里的碘是单质碘,而不是离子碘。
应用:检测食品中营养成分是否含有淀粉
5、DNA的染色与鉴定染色原理:
DNA 甲基绿→绿色
应用:可以显示DNA在细胞中的分布。
鉴定原理:DNA 二苯胺→蓝色
应用:用于DNA粗提取实验的鉴定试剂。
6、吡罗红使RNA呈现红色原理:
RNA 吡罗红→红色
应用:可以显示RNA在细胞中的分布。
注意:在观察DNA和RNA在细胞中的分布时用的是甲基绿和吡罗红混合染色剂,而不是单独染色。
7、台盼蓝使死细胞染成蓝色
原理:正常的活细胞,细胞膜结构完整具有选择透过性能够排斥台盼蓝,使之不能够进入胞内;死细胞或细胞膜不完整的细胞,胞膜的通透性增加,可被台盼蓝染成蓝色。
应用:区分活细胞和死细胞;检测细胞膜的完整性。
8、线粒体的染色
原理:健那绿染液是专一性染线粒体的活细胞染料,可以使活细胞中的线粒体呈现蓝绿色,而细胞质接近无色。
应用:可以用高倍镜观察细胞中线粒体的存在。
9、酒精的检测
原理:橙色的重铬酸钾溶液在酸性条件下与酒精发生化学反应,变成灰绿色。
应用:探究酵母菌细胞呼吸的方式;制作果酒时检验是否产生了酒精;检查司机是否酒后驾驶。
10、CO2的检测原理:
CO2可以使澄清的石灰水变混浊,也可使溴麝香草酚蓝水溶液由蓝变绿在变黄。
应用:根据石灰水混浊程度或溴麝香草酚蓝水溶液变黄的时间长短,可以检测酵母菌培养液中CO2的产生情况。
11、染色体(或染色质)的染色原理:
染色体容易被碱性染料(如龙胆紫溶液或醋酸洋红溶液)染成深色。
应用:用高倍镜观察细胞的有丝分裂。
12、吲哚酚试剂与维生素C溶液呈褪色反应
原理:吲哚酚即2,6-二氯酚靛酚钠,其水溶液为蓝紫色,维生素C具有还原性,能将其褪色。
应用:可用于检测食品营养成分中是否含有维生素C。
13、亚硝酸盐的检测出现玫瑰红
原理:在盐酸酸化条件下,亚硝酸盐与对氨基苯磺酸发生重氮化反应后,与N-1-萘基乙胺盐酸盐结合形成玫瑰红色染料。
应用:将显色反应后的样品与已知浓度的标准液进行目测比较,可以大致估算出泡菜中亚硝酸盐的含量。
14、脲酶的检测
原理:细菌合成的脲酶可以将尿素分解成氨,氨会使培养基的碱性增强,使PH升高,从而使酚红指示剂变红。
应用:在以尿素为唯一氮源的培养基加入酚红指示剂,培养某种细菌后,看指示剂变红与否可以鉴定这种细菌能否分解尿素。
15、伊红美蓝检测大肠杆菌
原理:在伊红美蓝培养基上,大肠杆菌的代谢产物(有机酸)与伊红美蓝结合使菌落呈现黑色。
应用:用滤膜法测定水中大肠杆菌的含量。
16、刚果红检测纤维素分解菌
原理:刚果红是一种染料,它可以与像纤维素这样的多糖物质形成红色复合物,但并不和水解后的纤维二糖和葡萄糖发生这种反应。
当在含有纤维素的培养基中加入刚果红时,刚果红能与培养基中的纤维素形成红色复合物。
当纤维素被纤维素分解菌分解后,刚果红-纤维素的复合物就无法形成,培养基中会出现以纤维素分解菌为中心的透明圈。
应用:筛选纤维素分解菌。
斐林试剂、班氏试剂和双缩脲试剂比较
斐林试剂和班氏试剂
(1)成分不同:班氏试剂的配置方法:400mL水中加85g柠檬钠和50g无水碳酸钠;50mL加热的水中加入8.5g无水硫酸铜。制成CuSO4溶液;把CuSO4溶液倒入柠檬酸钠溶液-Na2CO3溶液中,边加边搅,如产生沉淀可滤去。斐林试剂的配置为:斐林试剂甲液为0.1 g/mLNaOH的溶液。乙液为0.05 g/mL CuSO4的溶液。使用时,将4~5滴乙液滴入2 mL甲液中,混合后立即使用
(2)原理不同:柠檬酸钠和碳酸钠均为强碱弱酸盐,在水中它们均可水解产生OH-,与柠檬酸钠-Na2CO3溶液和CuSO4溶液混合时,Cu2+和OH-结合,生成Cu(OH)2与葡萄糖中的醛基(-CHO)反应生成砖红色沉淀。而斐林试剂则是CuSO4于NaOH发生反应生成Cu(OH)2。当然,无论用班氏试剂还是斐林试剂,归根结底都是Cu(OH)2与醛基(-CHO)在沸水浴加热条件下反应而生成砖红色的Cu2O沉淀,两者反应现象一样,这就是二者的相同之处。
(3)保存方式不同:斐林试剂甲和斐林试剂乙可产生较多地Cu(OH)2,很容易沉淀析出,因此斐林试剂一般为现用现配;而班氏试剂的配方中,柠檬酸钠为-Na2CO3一对缓冲物质,产生的OH-数量有限,与溶液混合后产生的Cu(OH)2浓度相对较低,不易析出,因此该试剂可长期保存。
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斐林试剂和双缩脲试剂
(1)浓度不同:斐林试剂甲为0.1 g/mL NaOH溶液,斐林试剂乙液为浓度为0.05 g/mL的CuSO4;双缩脲试剂A为0.1 g/mL NaOH溶液(与斐林试剂甲完全相同),双缩脲试剂B为0.01 g/mL的CuSO4溶液(与斐林试剂乙液浓度不同)
(2)使用原理不同:斐林试剂是新配制的Cu(OH)2溶液,它在加热条件下与醛基反应,被还原成砖红色的Cu2 O沉淀,可用于鉴定可溶性还原糖的存在。用斐林试剂鉴定可溶性还原糖时,溶液的颜色变化过程为:浅蓝色→棕色→砖红色(沉淀)。
鉴定生物组织中是否含有蛋白质时,使用的是双缩脲试剂,发生的是双缩脲反应。双缩脲反应实质是在碱性环境下Cu2+的与双缩脲试剂发生的紫色反应。而蛋白质分子中含有很多与双缩脲(H2NOC-NH-CONHH2)结构相似的肽键,所以蛋白质都能与双缩脲试剂发生紫色反应,可以用双缩脲试剂鉴定蛋白质的存在。
(3)使用方法不同:斐林试剂使用时,先将NaOH溶液和CuSO4溶液等量混合,而后立即使用;双缩脲试剂使用时,先加入NaOH溶液(2mL),振荡摇匀,造成碱性的反应环境,然后再加入3~4滴CuSO4溶液,振荡摇匀后观察现象。如果混合后使用或者次序颠倒,则过多的Cu2+(蓝色)使溶液生成的紫色被掩盖,实验效果不容易观察。