【实验三 红细胞脆性试验 1100字】范文118
[实验目的]
测定红细胞细胞膜对不同低渗溶液的渗透抵抗力。亦即测定正常动物红细胞的渗透脆性。
[实验原理]
正常的红细胞系混悬于等渗的血浆中,若置于高渗溶液内,则红细胞因失去内部液体而皱缩;反之,置于低渗溶液内,则水分进入红细胞,使红细胞两面凹陷的圆盘形变为球形,如继续膨大,即发生破裂溶解,形成溶血。红细胞脆性试验就是测定红细胞对低于0.9% NaCl溶液的耐受能力。耐受力高者,红细胞不易破裂,即脆性低。反之,耐受力低者,红细胞易于破裂,即脆性高。
凡上层液开始微呈淡红色,而极大部分红细胞下沉,称开始溶血或最小抗力(红细胞的最小抵抗力)。
凡液体呈均匀红色,管底无红细胞下沉,则称完全溶血或最大抗力 (红细胞的最大抵抗力)。
正常红细胞的最小渗透抵抗力为0.4~0.5NaCl%溶液,最大渗透抵抗力为0.3~0.35%NaCl溶液。一般说,刚成熟的红细胞膜的渗透脆性较小,而衰老的红细胞膜的渗透脆性较大。
生理学上将与血浆渗透压相等的溶液称为等渗溶液;而将能维持红细胞正常形态、大小和悬浮于其中的溶液称为等张溶液。等渗溶液不一定是等张溶液(如1.99%的尿素溶液),但等张溶液一定是等渗溶。
[实验动物] 鸡
[器材及药品]
试管,试管架,吸管,新鲜血(或去纤维蛋白血),1%NaCl,蒸馏水。 [方法与步骤]
1.先将试管分别排列在试管架上,按下表把1%NaCl稀释成不同浓度的低渗溶液,每管溶液均为2毫升。
2.采取血液,并在上列各管中各加入大小相等的血液l滴,然后用拇指堵住试管口,将试管慢慢倒置一、二次,使血液与管内盐水混合均匀。
3.在室温下静置~21小时,观察结果。
4.依下列标准判定出有无溶血、不完全溶血或完全溶血的氯化钠百分比浓度。
(1)试管内液体下层为浑浊红色,上层为无色或极淡色的液体,说明红细胞没有溶解。
(2)小试管内液体下层为浑浊红色,说明有未溶解的红细胞,而上层出现透明红色,说明有部分红细胞破坏和溶解,称为不完全溶血。开始出现部分溶血的盐溶液浓度,既为红细胞的最小抵抗力(表示红细胞的最大脆性)。
(3)小试管内液体完全变成透明红色,管底无红细胞沉积,说明红细胞完全溶解,称为完全溶血。引起红细胞最先全部溶解的盐溶液的浓度,既为红细胞的最大抵抗力(表示红细胞的最小脆性)。
(4)记录被检红细胞脆性范围,既开始溶解时的盐溶液浓度与全部溶解时的盐溶液浓度。
[注意事项]
1.配制的各种NaCl溶液必须准确。
2.各管中加入的血滴大小应尽量相等。
3.混匀时轻轻倾倒1~2次,减少机械震动,避免人为溶血。
4. 应在光线明亮处判定结果。
第二篇:红细胞渗透脆性试验 1000字
红细胞渗透脆性试验
[目的和原理] 目的:测定动物的红细胞对低渗溶液的脆性。原理:将红细胞放置于等渗溶液中,红细胞的形态不发生改变。放置于高渗和低渗盐溶液中红细胞的形态均出现改变,置于高渗液中,红细胞出现皱缩;置于低渗液中则发生膨胀,最后破裂,细胞内容物溢入血浆或溶液,这种现象称为溶血。
将血液滴入不同浓度的低渗盐溶液中,可以检查红细胞对低渗溶液的抵抗力。开始出现溶血现象的低渗盐溶液浓度,为该血液红细胞的最小抵抗力(约0.40%~0.45%NaCl溶液),而完全溶血则为该血液红细胞的最大抵抗力(约0.30%~-0.45%NaCl溶液)。对低渗盐溶液的抵抗力小表示红细胞的脆性大,反之表示脆性小,最大抵抗力到最小抵抗力的范围,称脆性范围。
[实验对象] 家兔
[实验器材] 试管架、5 ml试管十支、2 ml吸管两支、注射器、1%NaCl溶液、蒸馏水、枸椽酸钠。
[实验步骤]
(一)低渗盐溶液的配制
取试管十支,洗净烤干,用玻璃铅笔编号,排在试管架上,参照下表向各试管中加入1%NaCl溶液,然后再加入蒸馏水,每管溶液均2 ml。
蒸馏水(ml) 0.60 0.70 0.80 0.90 1.00 1.10 1.20 1.30 1.40 1.50 NaCl浓度(%) 0.70 0.65 0.60 0.55 0.50 0.45 0.40 0.35 0.30 0.25
(二)枸椽酸钠血的制备
家兔颈部解剖,剥离颈总动脉,插管,将血放入烧杯内,烧杯内事先加入3.8%枸椽酸钠溶液,血与枸椽酸钠溶液的比例为9:1,轻摇烧杯使之混匀。
[观察项目]
用注射器向每个试管内加入兔血一滴,用拇指堵住试管口,将试管颠倒2~3次(不要用力振荡以免溶血),在室温下静置1小时,然后观察各试管的透明度以判断是否溶血。
1、试管内下层为混浊红色,上层为无色或淡黄色液体,说明红细胞尚未破坏。
2、试管内下层为混浊红色,上层为透明淡红色,则表明红细胞部分溶解,才出现溶血的低渗盐溶液的浓度,为红细胞的最小抵力(最大脆性)。
3、试管内溶液呈现透明红色,说明红细胞全部溶解,称为完全溶血,首先引起红细胞全部溶解的低渗盐溶液浓度,即红细胞的最大抵抗力(最小脆性)。
通过试验,记录红细胞的脆性范围。
[思考题]
1、什么是红细胞的渗透脆性?
2、测定红细胞渗透脆性时,应注意什么?
1、 简要说明红细胞渗透脆性试验的意义?