EXPLORs——一种通过光可逆蛋白相互作用促使蛋白质装载入外泌体的新方式
胞外囊泡是天然的生物分子转运者,这些分子在细胞之间的交流扮演着重要的角色。基于这个理论,科学家们做了许多尝试,希望能利用胞外囊泡作为治疗性药物的载体。
无论是化学试剂还是核酸,这些大分子物质都可成功的装载于胞外囊泡中;然而,在装载高分子质量蛋白这方面却出现了大量问题。重组蛋白的提纯是一件非常耗时间和金钱的事情,而且很容易出现经过物理作用及化学作用导致蛋白质变性等问题。并且常见的蛋白装载方法效率极低。
来自KAIST Institute的研究者最近提出了一种新的蛋白质装载方法叫做EXPLORs,并且通过这项新方法克服了这些技术缺陷。
因为EXPLORs是通过胞内蛋白活跃装载进EVs产生的,在这个过程中使用了蓝色荧光,并且整个过程不包括蛋白提纯的步骤。
他们进一步阐释说,EXPLOR技术对于提高治疗性蛋白质的装载及转运效率具有重要意义。
研究者们进一步揭示了EXPLOR技术的潜力,这是一个新奇的生物制药平台,因为在试管内及试管外的实验中均成功的转运了诸如Cre recombinase一类的功能蛋白到靶细胞。
外泌体装载蛋白质方法(图)
重组蛋白从外部装载进入外泌体:这种重组蛋白能够通过多种方式装载入外泌体,比如单纯的孵化、冻融技术,声波降解法以及挤压法。
过表达蛋白的内在被动装载:这种蛋白质被动的装载进入外泌体通过外泌体生产细胞以低概率性过表达靶蛋白。
细胞核外膜锚定蛋白:这种蛋白附着在细胞核外膜的内层,因此能够和生物起源的外泌体形成共轭双键。外泌体通过EXPLOR装载蛋白:这种蛋白质在光照的情况下可以主动的装载进入外泌体。这种相互作用是可以进行反作用的,因此这些蛋白质能够以一种外泌体腔内自由的形式与外泌体膜分开。
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