小鼠肾被膜下移植瘤模型造模实验流程
肾被膜下血运较为丰富,比较适合那些对肿瘤营养环境要求苛刻的肿瘤细胞。
用于肾被膜下移植瘤的小鼠主要是 NOD-SCID 鼠(SCID 鼠与非肥胖糖尿病鼠(nonobese diabetic,NOD)杂交而来,T 和 B 淋巴细胞、抗原呈递细胞、循环组分及部分 NK 细胞缺陷),这种小鼠表型为白色毛发小鼠,对于饲养条件较为苛刻,需要无菌的 SPF 级饲养环境。
不易成瘤的肿瘤组织一般选择肿瘤肾被膜下种植移植瘤模型。建立模型时,同样首先需要将肿瘤组织用无菌 PBS(或 1640 培养基)洗涤 3 次,然后在无菌平皿上切成或用无菌剪刀剪成<1 mm3 体积的小块(种植前可裹基质胶)。
将小鼠用水合氯醛麻醉后俯卧于解剖板上,四肢用胶带固定,在肋脊角靠下的位置剪去约 1.5 cm 直径的皮肤毛发以备皮。75% 酒精消毒 3 次,用眼科剪将皮肤剪开约 0.5 cm 小口,依次分离皮肤、皮下、侧腹膜。
找到肾脏位置,小心仔细将肾脏提至皮肤切口出,用小尖镊子戳开肾被膜一小口,仔细将小块肿瘤组织送入肾被膜下,一般 2~3 块。然后将肾脏送回腹腔,依次缝合腹膜、皮下组织和皮肤。消毒后将小鼠放回饲养笼内。2~3 h 后观察是否苏醒。
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