哺乳动物基因表达载体
哺乳动物基因表达载体
在生物医学领域,利用常规转染将质粒载体转到哺乳动物细胞中是使用最广泛的方法。虽然近年来开发了不少更为先进的基因导入载体系统(如慢病毒载体、腺病毒载体、AAV载体和piggyBac等),但常规质粒基因表达载体仍被大多数实验室使用,这主要得益于其在技术上的简便性以及在各种类型细胞中的高效转染率。常规质粒载体转染的关键特点是短暂性,并且在宿主基因组中的整合效率非常低(通常小于1%)。
vectorbuilder生产质粒的优势
技术简单:常规转染即可把质粒转入细胞,相比起病毒载体需要进行病毒包装,过程更简单。
载体容量非常大:我们的载体总容量可达30 kb,其中质粒骨架只占3 kb,有足够大的容量可以放置客户所感兴趣的序列。
高水平表达:常规质粒转染细胞后,可以产生非常高的拷贝数(每个细胞多达几千拷贝),使外源基因能高水平表达。
相关推荐
-
病毒载体是什么?
质粒与噬菌体都有严格的宿主选择性,只能在相应的菌体中生存和繁殖,所以它们远不能完成载体在基因工程中所承担的全部使命. 动物细胞没有质粒,如果要向动物细胞导入外源基因,通常需要用到DNA病毒或RNA病毒 ...
-
腺病毒载体是什么?
结构组成及表达元件 腺病毒DNA末端结构突出特点 1)带有100bp反向的末端重复序列(ITR),而且在每一条单链的5'-末端还共价地连接着末端结合蛋白,对病毒的复制有重要作用. 当它从病毒颗粒中分离 ...
-
Tet-On诱导表达载体是什么?
Tet-On诱导型基因表达系统是控制哺乳动物细胞中目的基因定时表达的强大工具.Tet-On诱导型基因表达载体作用:当不存在四环素及其类似物(如doxycycline)的情况下,目的基因几乎或完全沉默: ...
-
哺乳动物基因表达piggyBac载体
PiggyBac载体系统可以非常高效地把外源DNA插入哺乳动物细胞的基因组,该系统技术简单,可利用质粒转染(非病毒转导)把您所感兴趣的基因长期稳定地整合到靶细胞基因组. 该系统来源于piggyBac转 ...
-
如何选择适合自己的重组病毒类型?
你是否遇到新方向的实验课题无从下手?相信每位同学都曾有过相关的经历,细胞君初入重组病毒同样迷茫.无所适从,多希望有个帖子告诉我这个实验怎么做.实验方法如何选择.今天好消息就来了,所谓术业有专攻,闻道有 ...
-
哺乳动物基因表达慢病毒载体
慢病毒载体系统是一种能非常高效的把外源基因稳定整合到哺乳动物细胞中的载体工具.除了常规质粒转染外,目前该系统也是把外源基因转入哺乳动物细胞的最常用方法之一.由于具有目的基因和启动子选择的灵活性以及转染 ...
-
哺乳动物基因表达MSCV载体
MSCV(Murine stem cell virus,鼠干细胞病毒)逆转录病毒载体系统是一种非常高效的.能在胚胎干细胞(ES).胚胎癌细胞(EC).造血干细胞(HS)及其他哺乳动物细胞系中大量表达目 ...
-
哺乳动物基因普通表达腺相关病毒载体
腺相关病毒(AAV)载体系统是一种备受欢迎的体内外基因传递系统,对哺乳动物多种类型细胞具有高效的转导效率.不同于腺病毒,AAV的免疫原性极低,在体内几乎没有致病性,使得AAV成为许多动物研究的理想工具 ...
-
非编码RNA表达质粒载体
常规非编码RNA表达质粒载体是在多种哺乳动物细胞中转染和表达非编码RNA的高效工具.非编码RNA是一类长度小于30个核苷酸或者大于200个核苷酸的功能性RNA,包括:小分子RNA(micro RNA, ...
-
质粒构建优势是什么?
病毒载体构建服务包含慢病毒.腺相关病毒.腺病毒和逆转录病毒载体等,构建内容包括基因过表达载体构建.基因定点突变表达载体构建.用于基因沉默的shRNA设计与构建.microRNA表达与封闭载体设计与构建 ...
-
纯化腺病毒载体构建流程
腺病毒是一种非常有效的转基因载体,可插入至37Kb的外源基因,高效的转导效率,可转导不同类型的人组织细胞,不受靶细胞是否为分裂细胞所限制,容易得到高低度,进入细胞内而不整合到宿主细胞基因组,仅瞬间表达 ...
-
重组腺相关病毒(AAV)载体构建技术原理
腺相关病毒(adeno-associated virus, AAV)是微小病毒科(parvoviridae)家族的成员之一,是一类无法自主复制.无被膜的二十面体微小病毒,其直径约20-26nm,含有4 ...
-
腺病毒构建原理
◆腺病毒(ADV)是一种无包膜的线性双链DNA病毒,其空间结构为立体对称的20面体,衣壳由252个壳粒组成,直径在100nm左右.现已知有51种腺病毒,根据组织嗜性不同被分成ABCDEF六个不同亚群, ...
-
慢病毒表达的优缺点有哪些?
优势 外源基因的稳定整合:常规质粒转染只能实现外源基因的瞬时表达,这种外源基因会随着宿主细胞的分裂而不断丢失,在快速分裂的细胞中显得尤为显著.相反的是,慢病毒转导的目的基因能稳定地整合到宿主细胞的染色 ...
-
rAAV是什么?
腺相关病毒(AAV)是哺乳动物最安全的基因传递载体之一,因为与腺病毒相比,它需要辅助病毒进行传播并产生相对温和的先天性和适应性免疫反应,这可能会引起严重的免疫反应.目前用于研究的重组AAV(rAAV) ...
-
植物基因表达质粒载体是什么?
将常规质粒载体导入植物细胞原生质体是一种广泛的使用方法,可通过化学转化或电转完成.虽然已经开发了其他基因表达载体系统(如双元载体),但常规质粒基因表达载体仍被大多数实验室使用,这主要得益于其在技术上的 ...