大鼠原位肝移植模型
动物案例
供体:Lewis大鼠、DA大鼠;
受体:BN大鼠
造模方法
二袖套一吻合法(门静脉和肝下下腔静脉行袖套法,肝上下腔静脉行吻合法)
供肝的获取
腹采用10%水合氯醛腹腔麻醉(0.3ml/100g),十字切口入腹,离断肝脏镰状韧带,将小肠移出腹腔外,以生理盐水纱布覆盖。游离胃小弯背腹侧的尾状叶盘状乳头突,近肝侧结扎并离断左膈下静脉,结扎并切断左肝至食管高位血管支,结扎右肾上腺静脉丛,并切断右肾动静脉。游离肝下下腔静脉至左肾静脉上缘,游离肝外胆管并行胆管内插管,经门静脉主干向肝脏内灌注含肝素50U的4℃生理盐水10ml,行肝脏冷灌注。当肝脏变白时,在靠近左肾静脉入口处剪断肝下下腔静脉,形成灌注液流出道,在膈肌上方横断肝上、下腔静脉,将供肝取出,置于4℃生理盐水内。
血管袖套制备
在4℃生理盐水中将门静脉与肝下下腔静脉壁外翻,分别套在外径2.10mm和2.76mm的聚乙烯管上,用5-0丝线环扎固定,完成袖套制备。
受体手术
大鼠麻醉后,上腹部直切口入腹,分步游离受体肝脏,游离完毕后将受体肝脏取出。将供肝自生理盐水保存液中取出置于受体原位,冰生理盐水纱布覆盖肝脏表面,以预置的7-0无损伤线吻合肝上、下腔静脉,吻合时,受体侧连同膈肌环一并缝合,先缝合后壁,从左侧开始,将缝线从血管外缝入腔内,在腔内连续缝合。针距控制在1mm,至右侧角时,将缝线穿出血管壁,在血管腔外与右侧角缝线打结。以同一缝线从右侧角连续缝合血管前壁,接近左侧角时,向肝上、下腔静脉内注入4℃生理盐水,驱出血管腔内的空气,至左侧角时,与原缝线打结。以弯血管夹在吻合口近肝侧钳夹肝上、下腔静脉,更换下小儿Satinsky心耳钳,检查吻合口是否出血。吻合成功后,经门静脉向供肝内灌注4℃生理盐水10ml,排除肝内的肝素盐水,夹闭肝下下腔静脉,将供肝门静脉套管插入受体门静脉内,开放门静脉及肝上、下腔静脉阻端夹,结束无肝期。肝下下腔静脉的吻合方法与门静脉相同,最后将供体胆管插入受体胆管插管内,按层缝合腹壁。
大鼠肝脏移植 供肝缝合完毕准备“套袖”连接血流结束无肝期
造模周期
约1h一对
模型成功率
95%以上
病理鉴定及图片
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HE染色×100倍同种异体移植