选修1|微生物的利用-开展配制培养基和倒平板的活动情况记录
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最近在开展选修1教学,需要开展活动来学习相关知识,收获到了较好的效果。做了相关的活动,明显感觉到理解理论知识和解析试题时容易理解,做到事半功倍。
第一部分微生物的利用有两个实验,考虑到实验和学校实际相联系,我采用整合后分别完成相关的步骤,3个课时完成,有相关的方案提供。今天先推送第1课时《培养基的配制》。
配制培养基和倒平板
配制培养基:计算→称量→熔化→调pH→分装→加封口膜→灭菌→倒平板。
1.计算
由于是一个班级分为四个大组,在教材原有基础上扩大6倍,300mL LB固体培养基(蛋白胨3g,酵母提取物1.5g,氯化钠3g,加入水300 mL,琼脂6g),加入到烧杯中。
2.称量
在电子天平上操作。称量需要在滤纸上,防止腐蚀,在称量过程中,蛋白胨、酵母提取物用药匙取放不容易时,用玻璃棒帮助。
3.熔化
实验通过微波炉加热熔化,时间大概需要10分钟。
搅拌
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4.调pH
理论上,偏酸加NaOH,偏碱加HCl,使pH呈弱碱性,大概的pH7.2-7.6,可以用pH计检测。事实上,用1mol/L NaOH溶液调节pH至偏碱性。
5.分装
从烧杯中加入到锥形瓶中。
6.加封口膜
现在用封口膜取代棉塞,相对简单方便。
7.高压蒸汽灭菌
学校有容量小的手提式高压灭菌锅和容量大的立式高压灭菌锅,一个班级是四大组,数量不多,用手提式高压灭菌锅。
将锥形瓶(含培养基)、培养皿等用牛皮纸(用报纸替代)包好,放入灭菌锅内,1kg/cm2压力灭菌15min(121℃)。注意:计时从达到压力时开始维持15min,实验结束时压力要达到0才打开锅盖。具体的使用看文章后相关链接。
8.倒平板(超净台上操作)
由于灭菌后需要较长时间冷却(立式灭菌锅有冷却水设备),倒平板的操作需要在课外时间操作(也可以有第二个班级操作倒平板,下次再轮换)。
倒平板
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灭菌后,待固体培养基冷却至60℃左右时在酒精灯火焰附近操作进行。其过程是:①将灭过菌的培养皿放在火焰旁,右手拿装有培养基的三角瓶,左手拔出棉塞;②右手拿三角瓶,使三角瓶的瓶口迅速通过火焰;③用左手将培养皿打开一条稍大于三角瓶口的缝隙,右手将培养基倒入培养皿,立刻盖上皿盖;④待平板冷却凝固后,将平板倒过来放置。
视频:倒平板
活动后的反思
通过这次活动有以下几方面的收获和改进。
成功之处:
1.学生的热情高涨,通过动手激发了学习生物的热情。实验是在一定的理论基础上进行,对学生的解题和课堂上的分析试题带来了很大的帮助。
2.实验之前准备充分,特别是有具体的步骤方案,实验过程中井然有序。
3.实验之前让学生分工明确,通过合作效率较高。任务明确每人必须做一个平板。
改进之处:
1.学生在试剂的使用和摆放等习惯方面需要强调,即需要整齐,特别是称量取用后放回原处的习惯(如图)。
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2.由于一个大组人数偏多,在倒平板的时候需要适当温度高点就可以开始,否则到最后一位学生倒平板就会过于冷却很难完成(如图)。
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有些图片来自于网络(侵删)