基因编辑小鼠和胚胎移植

基因编辑小鼠是指通过基因编辑技术对特定目标基因进行“修饰”，从而在小鼠体内实现DNA片段的删除或添加。基因编辑小鼠被广泛用于研究基因对小鼠功能的影响，也被用于构建各种疾病模型，模拟人类疾病的发生发展过程以及相应药物的研发。

基因编辑小鼠的制备方式主要有两种，一种是ES细胞囊胚注射，另一种是受精卵显微注射。无论哪种方式，基因编辑都是在受精卵水平进行操作，为了拿到基因编辑动物，则必须经过胚胎移植，在动物体内发育为完整的个体。

● 基于采用ES细胞囊胚注射方式获得基因修饰小鼠的过程如下：

先对小鼠胚胎干细胞进行基因编辑，将基因打靶获得的阳性ES细胞进行囊胚注射，再胚胎移植到假孕母鼠体内获得高嵌合小鼠，高嵌合小鼠进一步与野生型小鼠进行交配，即可最终获得基因编辑小鼠。

Fig.1 采用ES细胞囊胚注射方式获得基因修饰小鼠的过程

● 基于受精卵显微注射技术构建基因修饰小鼠的过程如下图所示，

主要包括：gRNA设计和筛选，sgRNA表达载体构建，显微注射，胚胎移植，小鼠繁殖等过程。

Fig.2 采用受精卵显微注射方式获得基因修饰小鼠的过程