FDA 20210303在线培训-11
二类DMF中与气/液相色谱方法有关的常见缺陷
范围与目的
讨论DMF申报资料中气相和液相方法有关的常见问题
一 易纠正问题
一 与分析方法有关的常见问题
一 与方法验证有关的常见问题
说明CMC方面的期望
协助行业提高DMF质量，避免不必要的审评轮次
易纠正的分析方法问题
引用了药典方法，但没有提交分析方法描述
没有色谱柱的生产商和品牌信息
在整个分析运行中未证明系统适用性
将“ug/ml”误作“ppm”
易纠正的分析方法问题（续）
处理特殊样品时在方法里没有注意事项说明，尤其是高吸湿性DS、不稳定的对照品/样品溶液
杂质检测方法中未声明报告限或舍弃限
有多个样品制备或溶液多次进样，但在方法里未规定接受结果的标准
分析方法常见问题
系统适用性可接受标准不足
一 对照液多次进样%RSD不符合USP<621>中含量要求
一 杂质和残留溶剂检测中未证明系统灵敏度
一 紧前紧后峰分离度标准缺失或不足
一 无峰拖尾接受标准，尤其是使用等度方法时
一 系统适用性可接受标准无验证数据支持
分析方法常见问题
使用DS对照品的色谱纯度作为DS对照品的效价
修改药典或经验证方法的色谱条件时超出验证范围
采用药典方法时使用了不同色谱柱，但没有证明柱子的等同性
案例研究1---修改色谱条件
情景---公司提议增加一个药典杂质HPLC方法的进样量。该杂质含量采用峰面积归一法计算：
问题：
一之前经过验证的线性范围是否仍适用
一 每个指定杂质的RRF是否变化
案例研究1（续）
要求公司
一 重新验证线性
一 根据斜率重新计算各杂质RRF
一 重新验证准确性
结果
|
被分析物质名称 |
斜率 |
RRF |
CF |
|
API（样品浓度的80-120%） |
175931 |
1.00 |
1.00 |
|
杂质1 |
226652 |
1.29 |
0.78 |
|
杂质2 |
232180 |
1.32 |
0.76 |
|
杂质3 |
291579 |
1.66 |
0.60 |
|
杂质4 |
162810 |
0.93 |
1.08 |
一 除了杂质4以外，其它杂质的RRF均不在0.8-1.2范围内
方法验证常见问题
USP方法实施时未经确认
缺失方法等效性研究
一 使用了自建方法取代USP各论方法
一 采用USP各论方法替代自建方法
与方法验证有关的常见问题（续）
杂质HPLC方法中QL-120%限度范围内缺失DS的线性数据
使用非常干净的DS样品验证一个杂质方法
一 方法精密度、中间精密度
一 耐用性
提交的原始数据不能直接用于评估
一 方法耐用性证明所用峰面积
一 方法精密度和中间精密度所用峰面积
与方法验证有关的常见问题（续）
强降解研究缺失或不充分
一 样品降解不充分或过度降解
一 含量和杂质方法分析的强降解样品不一样
一 没有说明质量守恒情况
案例研究4----质量不守恒
情景----高温降解样品的含量结果为83.2%，而有关物质HPLC方法检出总杂只有2.6%。质量严重不守恒
问题----有关物质方法检不出降解产物
要求公司调查根本原因
一 在约35分钟处发现一个流出较晚的峰
一 使用不同固定相柱了开发一个新的HPLC方法
一 使用新旧方法同时检测同一强降解样品
|
强降解条件 |
含量（W/W） |
总杂 |
总质量 |
|
控制样 |
99.6% |
0.2% |
99.8% |
|
105°C/48小时 |
83.2% |
2.8%（方法1） |
86.0% |
|
105°C/48小时 |
83.2% |
14.9%（方法2） |
98.1% |
与方法验证有关的常见问题（续）
当DS样品不能全部溶解时未证明萃取效果
一 加标样品适合于全溶DS样品
一 模拟样品适合于部分溶解DS样品
案例研究5---样品制备验证
情景---开发了一个LC-MS方法用于定量检测痕量GTI。由于溶解度有限，DS样品不能完全溶解。通过在DS中加入GTI贮备溶液验证方法准确度。
问题----样品制备的萃取效果未经过验证
要求公司使用模拟DS样品
参考文献
USP<621>色谱法
USP<467>残留溶剂
USP-PF 39(5)：修订---USP色谱方法的系统适用性--小分子
USP<1010>：分析数据--解释与处理
MAPP 5310.7：替代药典【BP/EP/JP】对照品的可接受度
FDA指南：药品和生物药品的分析方法和方法验证（2015）
ICH Q2：分析方法验证：正文与方法学
FDA审评员指南：色谱方法的验证（1994）
USP<1225>：药典方法的验证
USP<1226>：药典方法的确认