实验诊断-临床常见病原体检测:性传播疾病病原体检测

性传播疾病病原体检测

性传播疾病(sexually transmitted disease, STD)
简称性病,是一类能通过各种性接触、类似性行为及间接接触而传播,主要侵犯皮肤、性器官和全身脏器损害的疾病。包括梅毒、淋病、艾滋病、软下疳、性病淋巴肉芽肿、非淋菌性尿道炎、生殖器疱疹、尖锐湿疣、生殖器念珠菌病、细菌性阴道病、滴虫病等20余种疾病,其中前3种属于《中华人民共和国传染病防治法》规定管理的乙类传染病。
一、流行病学和临床类型
(一)流行病学
1.病原学  细菌(淋病奈瑟菌,杜克雷嗜血杆菌等)、病毒(人类免疫缺陷病毒,人乳头瘤病毒,单纯疱疹病毒-Ⅰ等)、支原体(解脲脲原体,生殖支原体等)、螺旋体(梅毒螺旋体等)、衣原体(沙眼衣原体D-K型,L1,L2,L3型等)、真菌(白念珠菌等)和原虫(阴道毛滴虫等)。
2.传播途径  性行为传播、间接接触传染、血液与血制品传播、对胎儿与新生儿的传播、职业传播
(二)常见临床类型
1.获得性免疫缺陷症(AIDS)  又称艾滋病,由人类免疫缺陷病毒(HIV)通过结合细胞表面的CD4蛋白受体进入易感细胞引起部分免疫系统被破坏。
2.梅毒(shyphillis)是由苍白密螺旋体引起的疾病,一般过程可分为三个阶段:一期梅毒、二期梅毒、三期梅毒。
3.淋病(gonorrhea)  由淋病奈瑟菌引起的泌尿生殖系统的急性或慢性化脓性感染。
4.非淋菌尿道炎(non-gonococcalurethritis, NGU)主要是由沙眼衣原体、解脲脲原体等通过性接触所引起的尿道炎症。
5.生殖器疱疹(genitalherpes)尖锐湿疣(condyloma acuminatum)  分别由单纯疱疹病毒和人乳头瘤病毒所引起的性病。
6.软下疳(chancroid)由杜克雷嗜血杆菌(Haemophilus ducreyi) 感染而引起的性病。
二、检查项目和临床应用
(一)AIDS病原体检测
1.HIV的分离培养  病毒培养是检测HIV感染最精确的方法。
2.抗HIV-1和抗HIV-2的检测  常用的试验方法有颗粒凝集实验、酶联免疫吸附试验、免疫荧光法、蛋白印迹法等。
3.p24抗原检测  在病毒开始复制后即可检测血液中的可溶性p24抗原,但易出现假阳性。因此,阳性结果必须经中和试验确认,该结果才可作为HIV感染的辅助诊断依据。
4.HIV 核酸检测
(1)HIV病毒载量检测
(2)HIV耐药基因型检测
5.其他实验室检查
(二)梅毒病原体检测
1.暗视野显微镜检查  是诊断早期梅毒快速、可靠的方法,尤其对已出现硬下疳而梅毒血清反应仍呈阴性者意义更大。
2.梅毒血清学试验
(1)非梅毒螺旋体抗原试验:目前常用性病研究实验室试验(VDRL)、快速血浆反应素环状卡片试验(RPR)及甲苯胺红不加热血清反应素试验(TRUST)。
(2)梅毒螺旋体抗原试验:检测血清中梅毒螺旋体抗体,其敏感性和特异性均较高,现常用荧光螺旋体抗体吸收试验( FTA-ABS)、梅毒螺旋体血凝试验( TPHA)、ELISA及化学发光方法。
3.脑脊液检查
4.基因诊断技术检测梅毒螺旋体(TP-PCR)
(三)淋病病原体检测
1.涂片检查   男性急性淋病直接涂片检查到多形核白细胞内革兰阴性双球菌即可诊断,其阳性率可达95%;女性病人阴道及宫颈杂菌较多,因此女性病人及症状轻或无症状的男性病人,均以作淋病奈瑟菌培养检查为宜。
2.分离培养   培养法为诊断淋病的金标准。
3.PCR法  对淋病奈瑟菌培养阴性、临床怀疑淋病奈瑟菌感染者,亦可应用PCR检测淋病奈瑟菌DNA以协助诊断,但应注意该方法易出现假阳性结果。
(四)非淋菌尿道炎病原体检测
1.沙眼衣原体临床标本的直接检查  临床标本的沙眼衣原体可在敏感细胞中增生形成包涵体,对临床标本作姬姆染色和碘染色,如发现有一定数量的具特征性的包涵体即可作出诊断,此法操作简便易行,但仅适用于新生儿眼结膜炎刮片的检查,对NGU检查不够敏感。
2.沙眼衣原体的分离培养
3.解脲支原体的分离培养
4.血清学试验
5.分子生物学方法  PCR反应、荧光定量PCR反应、DNA杂交等。
(五)生殖器疱疹和尖锐湿疣病原体检测
1.生殖器疱疹病原体检测
培养法、直接检测法、改良组织培养法、细胞学法、PCR法、血清学方法。
2.尖锐湿疣病原体检测
细胞学宫颈涂片检查、5%醋酸试验、免疫组化检查、分子生物学法。
(六)软下疳病原体检测
1.直接涂片  镜下可见到革兰阴性短杆菌,呈长链状排列,多条链平行,似“鱼群状”。
2.培养  标本在选择性培养基上培养,可出现典型菌落,取典型菌落作细菌涂片,可见到革兰阴性短链杆菌。
3.血清学检测  目前认为IgM抗体敏感性为74%,IgG抗体敏感性为94%,其特异性分别为84%和64%。尚未得以临床推广。
4.核酸检测

考试无捷径、学习有方法

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