乙肝在研新药应用，单独添加抗εPNA，导致95%逆转录抑制

反义PNAs和siRNAs，是最近被科学家发现的2种有前途治疗慢性乙肝方法。例如，PNAs已在慢性乙肝鸭子的动物模型中证明，具有抑制DHBV复制潜力；此外，研究人员还注意到，CPPs可作为载体提高PNAs和siRNAs摄取效率有帮助。

乙肝在研新药应用，单独添加抗εPNA，导致95%逆转录抑制

研究报告实际上，是在提及细胞穿透肽在乙型肝炎病毒治疗性寡核苷酸传递中的应用（发表于12月21日Pharmaceuticals）。那么，PNAs的单独使用，对治疗慢性乙肝也同样具有潜力呢？想要认识这一点，先了解当前批准用于慢性乙肝治疗药物都是针对乙肝病毒的聚合酶，而且由于停止治疗后，HBV复制也常出现反弹。

单用PNAs的潜在抗HBV作用

单纯从作用机制方向，PNAs是有希望成为当前抗病毒药物的替代方案。在DHBV感染模型中，研究人员研究了PNAs单独靶向epsilon（ε）的能力，epsilon（ε）是hepatnavirus的包封信号，在乙肝病毒逆转录（RT）的启动中起重要作用，从而抑制乙肝病毒复制。研究团队首次单独使用了抗-bvymar系统的抗病毒活性。为了测量抗εPNA单独的活性：

研究人员在RT反应后进行了定量斑点杂交分析，并在闪烁计数器中测量放射性。结果表明，PNAs靶向（ε）在低纳摩尔浓度下对DHBV-RT表现出很强的抗病毒作用，并且具有序列特异性。有趣的是，抗εPNA诱导DHBV逆转录酶呈剂量依赖性下降。重要的是，PNA2053（H-gca-atg-acg-taa-Lys-NH2）似乎比PNA2052（H-tag-acg-taa-aga-tac-Lys-NH2）更有效（抑制率>90%）。

这些PNA活性差异，可以用它们的结构来解释。事实上，PNA2053不仅对PNA2052那样未配对的突起起到补充作用，而且对整个epsilon上茎也起到了补充作用。RT-9对乙肝病毒无抑制作用，为进一步确定其抑制特异性，对一个2碱基错配的PNA和S-ODN进行了检测，结果表明，对照PNA对DHBV-RT没有明显的抑制作用，说明PNA具有很高的特异性。

同时，单用抗εPNA抑制RT确实是时间依赖性的，在DHBV聚合酶表达开始时，单独添加抗εPNA可导致95%的逆转录反应抑制；而在反应结束时，单独添加的抗εPNA仅抑制RT延长37%（数据来自：Pharmaceuticals）。综合来讲，以上数据说明，PNAs在DHBV逆转录机制的早期起作用。其次，在鸭原代肝细胞培养物中检测抗εPNA，对DHBV感染的抑制作用。使用分子生物学方法，检测HBV清除率，在与未经治疗的PDH对照组相比时，单用εPNA可使病毒DNA减少30%。

单用siRNA的抗HBV作用

其作用机制方向，因乙肝病毒复制需要逆转录合成前体RNA的关键步骤，研究人员开发并使用siRNA靶向HBV基因，能够抑制乙肝病毒复制。在这项研究基础上，研究人员发现，siRNA可显著降低进入Huh-7细胞的乙肝表面抗原（HBsAg）和乙肝e抗原（HBeAg）的表达。更重要的是，在所有的siRNA中，靶向S和P基因的pSi-HBV1是最有效的。

事实上，pSi-HBV1在转染72小时后，导致HBsAg和HBeAg抗原表达分别下降86%和83%。特异性靶向HBVRNA的siRNAs，如pSi-HBV1和pSi-HBV2导致所有病毒转录物减少90%。另外，在其他研究中，RNAi在抗乙肝治疗中，应用潜力也得到了明显证实。实际上，RNA干扰靶向HBV-DR元件和编码核心、聚合酶、PreS、S和X蛋白的区域，能够有效地抑制乙肝病毒复制。

2020年即将收尾，全球科学家在年末证实了一些新药物，如PNAs和siRNA，是开发有效治疗慢性乙型肝炎病毒感染的有力工具。后续小番健康将继续跟进，PNAs和siRNAs在治疗慢性乙肝药物研发领域研究进展。