【衡道丨干货】一种新的细胞块制作方法
目前用于制备细胞块的技术已经比较成熟，这些技术的主要原理是将细胞浓缩并加工成细胞蜡块。所有类型的细胞学标本，例如细针抽吸物，液基标本，刷检标本，体液和刮擦的细胞都适合被制备成细胞块。细胞块为细胞学诊断提供了额外的组织学形态，并可用于免疫组织化学、分子病理等辅助检测方法。某些细胞学标本，尤其是浆膜腔积液，以及支气管内经超声细针抽吸标本可能含有较多组织碎片、黏液，血液和脂肪，这些物质的存在稀释了诊断用的细胞，延长了筛查的时间，并增加了诊断难度。日前，芬兰坦佩雷大学医院的Heli医生自创了一种新的细胞块制作方法，价格便宜量又足，现将该方法介绍如下。
宜昌市中心人民医院
病理科
王晓璐
标本前处理：
用移液管从标本容器底部收集最大量的标本，将标本以1500 rpm离心5分钟（普通离心机）。将上清液倒回标本容器，然后，将1-2 ml红细胞裂解液添加至标本中并混合，将混合物孵育5-10分钟。裂解物的量和孵育时间取决于标本内的血液的多少。
步骤1：
将致密的尼龙布料安装到细胞漏斗中（图1a–c）。将离心机金属底座中的载玻片替换为吸水纸，并包裹致密的尼龙布料。吸水纸的功能是产生吸力，这有助于在离心过程中将标本附着在尼龙布料上。值得注意的是，裂解后的部分红细胞会通过尼龙布料进入吸水纸中。将尼龙布料包裹的吸水纸放在金属底座上，并用硅胶框架覆盖。硅胶框架的类型和细胞漏斗的大小取决于细胞标本量。将细胞漏斗紧紧地扣在硅胶框架上。
图1a. 新的自制细胞块方法。a.制作细胞块套装和细胞漏斗所需的材料：致密的尼龙布料、细胞漏斗配套的金属底座、吸水纸，两种类型的细胞漏斗和硅胶框架（取决于标本量）。
图1b. 在金属底座中，将载玻片替换为用致密尼龙布料包裹的吸水纸。
图1c. 将尼龙布料包裹的吸水纸放在金属底座上，并用硅胶框架覆盖。将细胞漏斗紧紧地扣在硅胶框架中。
步骤2：
通过细胞漏斗将细胞学标本离心到尼龙布料包裹的吸水纸上。将细胞学标本倒入细胞漏斗中，并以2000 rpm离心5分钟（樱花Cyto-tek细胞离心机）并弃去上清液。
步骤3：
包埋（图1d–f）。打开细胞漏斗，可见细胞已浓缩凝集在硅胶框架内的尼龙布料上。将布料折叠以便将细胞凝块放入处理盒中。建议包裹时将其折叠多次。将细胞凝块固定在包埋盒中，也可以使用泡沫来固定，准备进行组织处理。
图1d. 硅胶框内已准备好浓缩凝集的细胞凝块。注意细胞凝块的厚度，可以进行大量切片。
图1e. 将细胞凝块包裹在折叠的尼龙布料中。
图1f. 包好的细胞凝块已放入处理盒中，准备进行组织处理。
图2a. 黏液性腹水标本，腺癌。细胞块，细胞块图片。
图2b. 黏液性腹水标本，腺癌。细胞块，镜下图片。
图2c. 支气管涂片，原发性肺癌，细胞块。
图2d. 支气管涂片，原发性肺癌，细胞块镜下观。
图2 e. 甲状腺针吸标本，细胞块。
图2 f. 在处理之前，将甲状腺针吸标本中的红细胞裂解。不同大小和形状的滤泡符合结节性甲状腺肿的诊断。
这种新的自制细胞块技术，关键在于使用致密的尼龙布料，可以富集大量固态浓缩细胞块并进行连续切片。该方法可用于乙醇固定标本，也适用于其它固定液或新鲜的非固定标本。实践证明，它在浆膜腔积液，支气管标本和血性抽吸物诊断中的作用尤其重要，提高了送检样本细胞的可识别度，给病理医生提供更多诊断信息，并可实施免疫组化及分子检测用于辅助诊断。由于细胞学标本的收集比侵入性的手术方法更方便，因此细胞块对于细胞学的未来发展至关重要，我们可以用更少的钱做更多的事情。
参考文献：
Heli Hakso-Mäkinen, Ivana Kholová. New Cell Block Method to Enhance the Cellular Yield in Mucous and/or Bloody Samples. Acta Cytol,2020;64(3):265-269.