磁性微球的细胞分离和蛋白质分离和纯化

磁性微球的应用磁性微球的应用:磁性微球因为具有磁性,在磁场作用下可定向运动到特定部位,或迅速从周围介质中分离出来。这些性能使其具有极广阔的应用前景,因而在细胞分离、蛋白质分离和纯化、固定化酶、免疫分析测定、靶向药物、DNA分离与核酸杂交等领域有着广泛的应用前景。

1、细胞分离磁性微球用于细胞分离是将生物分子亲和反应的专一性和固定化生物分子易于分离的特点结合了起来。磁性微球作为不溶性载体,在其表面接上具有生物活性的吸附剂或其它配体(如抗体,荧光物质,外源凝结素等)活性物质,利用它们与指定细胞的特异性结合在外加磁场作用下将细胞分离,分类以及对其种类和数量分布进行研究。磁性粒子在分离癌细胞和正常细胞方面的动物临床实验已获成功,有人将粒径为3um的磁性微球外接抗小鼠Fc抗体(免疫球蛋白),用于小鼠骨髓中癌细胞和正常细胞的分离,分离率达99.9%以上。磁性亲和细胞分离在血液学研究和血液病治疗取得了成功,在骨髓移植的临床实验中,曾采用免疫磁性微球去除自体骨髓移植物中残存瘤细胞以降低白血病复发的机会,同样的方法用于选择性去除异体骨髓移植物中的T细胞以防止移植物抗宿主病的发生。

2、蛋白质分离和纯化以磁性微球为固相介质对蛋白质进行提纯是一项新兴的蛋白质分离技术。传统的蛋白质分离方法如盐析、有机溶剂、膜分离技术、离子交换技术和层析技术等,通过改变pH值、温度、离子强度、介电常数等因素来达到分离的目的,分离过程繁杂,而且目标蛋白质的损失大。而蛋白质的磁分离是通过对磁性微球表面的改性,共价结合能被目标蛋白质识别和可逆结合的配基,然后进行目标蛋白质的分离。在磁分离过程中,将磁性微球直接放入含有目标蛋白质的混合溶液中,目标蛋白质与磁性微球紧密结合,然后利用外部磁场进行分离。整个分离过程不需对混合溶液的pH值、温度、离子强度和介电常数进行调整,从而避免了传统分离过程中蛋白质的损失。与传统分离方法相比较,蛋白质的磁分离技术具有快速、高纯、高收率等优点。

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