做外泌体RNA的注意了！即使无外泌体的血清也可能干扰你细胞外泌体RNA组成！

做外泌体RNA的注意了！

即使去除外泌体的血清也可能干扰你细胞外泌体的RNA组成！！

胎牛血清（FBS）已在真核细胞培养中使用了几十年了。然而，很少有人关注FBS的RNA对培养的细胞会产生什么样的生物学效应。来自哈佛医学院的研究人员用RNA测序，证明了FBS含有蛋白质编码和调控的多种RNA，包括mRNA、miRNA、rRNA和snoRNA等。它们中的大多数（>70％）仍然存在于细胞外囊泡（EV）和细胞间通讯研究中常使用的长时间超速离心得到的无囊泡FBS（vesicle-depleted FBS, vdFBS）中。FBS相关的RNA会在分离细胞外膜泡RNA（exRNA）时一同被分离出来，这会对下游RNA分析造成干扰。许多进化上保守的FBS源的RNA种类会被错误地认为是人或小鼠细胞的转录本。值得注意的是，在FBS中含量丰富的一些miRNAs，如miR-122、miR-451A和miR-1246，先前已被报道为在培养细胞来源的细胞外膜泡中富含的miRNAs，这可能是胎牛血清中miRNAs造成的假象。对公开可用的exRNA数据库的分析支持FBS污染的概念。此外，FBS转录本可被培养的细胞吸收，并影响高度敏感的基因表达谱技术的结果。因此，实验设计过程中采取减少FBS源RNA干扰的预防措施是非常有必要的。

参考文献：Wei, Z., et al. (2016). "Fetal Bovine Serum RNA Interferes with the Cell Culture derived Extracellular RNA." Sci Rep 6: 31175.