iPS细胞的诱导方法及技巧

科学家最早用逆转录病毒，将多能基因 Oct4、Sox2、c-Myc 和 Klf4 导入细胞获得 iPS细胞，此方法有外源基因插入的风险，后续有科学家用腺病毒，质粒转染法，合成 RNAs和蛋白质等无外源基因整合风险的方法将多能基因导入细胞获得 iPS 细胞。 iPS 重编程过程中，多能基因的选择至关重要，目前已知的候选基因有Oct4、Sox2、c-Myc、Klf4、Nanog、Lin-28等，但是在研究中有研究者发现，除了 Oct4 外其他的基因都可被其他转录因子所代替，因此这也间接证明了 Oct4 是诱导形成 iPS 细胞的必需基因。利用多能基因方法效率都极低，相对而言，最高的是有外源基因插入风险的逆转录病毒载体法。因此，科学家们不断探索更安全更高诱导效率的方法。有研究者发现，在诱导过程中加入丙戊酸 VPA，维生素 C，SV40 大T抗原，强力霉素等小分子能提高诱导效率。目前在实验室应用最多的是质粒和仙台病毒，在再生医学方面应用最多的是附加型质粒，在体外研究应用最多的是逆转录病毒和质粒。