技术达人精品课20171206-王华【Q&A】（下）

在《常规制片的技术细节与常见问题的解决思路》直播中，小伙伴们参与热情太太太高，提出了30多个问题，高效的王华老师，已经全部解答完毕！昨天推送了Q&A上篇，今天下篇来啦，快和小衡一起看看吧，文末有彩蛋哦~~

刘明

宫颈腺上皮核与浆染色一致，导致难以区分核与浆，有何办法让浆红染一些呢？谢谢。

王华

从您通过私信发来的图片看，是苏木素染色不够深，伊红染色不够艳丽所致。建议提高伊红的染色程度。

塞翁失马

感谢王老师的分享，王老师，我们最近切片蜡带老是起卷，不成蜡带，以前没这种现象，请您指导一下可能发生的原因，谢谢。

王华

有可能是以下几个原因：1、石蜡品质改变；2、切片角度变化；3、空气湿度变化；4、切片机回缩功能被关闭。请自己寻找异常情况。

莫小小

王老师，我按你那个技术书的苏木素配方配置，后面过滤的时候又好多结晶类的东西？875ml水+100g硫酸铝钾，5g苏木素那个。

王华

实在是不好意思，笔误把硫酸铝钾的量写错了，应该是50克。硫酸铝钾的饱和浓度约为5%。

李慧

怎么分辨颤痕是脱水还是切片造成的？

王华

先检查脱水梯度酒精浓度设置，再看看颤痕出现的规律，再换不同的人对出现颤痕的蜡块重新切片看看是否还有。原因得自己找啊……

抹茶达思

冬天切子宫的组织容易跳刀，夏天不会叻，怎么会这样？

王华

如果你们的脱水机不具有加温脱水的功能，冬天气温低试剂渗透交换减慢，冬天的组织脱水效果差过夏天是可以理解的。

紫色梦影

王老师，怎么区分脱水不够还是脱水过了?

王华

您遇到了怎样的具体问题？这样的问题让我不知道怎样回答……

越努力越幸运

宫颈锥切的标本，很难切，灼烧的，总是卡到刀，这种组织应该怎么切好点？

王华

宫颈不好切很多时候是脱水不良导致组织过硬，请优化脱水流程。

丫丫

多少张片子换一次试剂呢？

王华

亲，我不知道怎样回答您的问题呢……因为使用不同的试剂不同的染色流程，试剂更换的频次是不一样的。

莫小小

二甲苯稀释封片剂，比例如何？

王华

亲，我只能说您得自己摸索，因为这是通过实践才能得到答案的。不同的中性树胶粘稠度不一样，稀释比也是不一样的。

陈陈

苏木素使用甘油会不会使染色更鲜亮

王华

苏木素染液加甘油的主要目的是使染液更稳定，不容易产生沉淀和氧化膜，并不会使苏木素颜色更艳丽。加了甘油的苏木素染液会引起粘液的苏木素着色加深的现象，需要通过加强分化将粘液中过深的苏木素染色分化掉。

如沐春风

王老师，请问不同配方的苏木素在分化时该如何掌握？

王华

亲，我只能回答：自己做对照实践摸索……

跳出三界

苏木素大约多久换一次？老师。

王华

每一个实验室的工作量和染色流程不一样，更换苏木素的频次也是有所差异的，您得自己建立适合自己试验室的SOP，王老师给不了标准答案……

梅

王老师，如果脱水的标本放在锅里煮过后，怎么样去补救？

王华

哇，什么原因导致标本被煮？你们打算干嘛？

这个问题王老师没有实践经验，不知道怎样补救呢……

是否可以说一句：肉已经熟了，可以“开餐”了……

稳

请问王老师，我们脱水和染色都是用TO，建不建议用含有二甲苯的树胶？

王华

TO与二甲苯是互溶的，理论上是可以用的。

童话

我们是基层医院，标本太少了 请问染液 还有脱水机 应该按标本数量来算换的时间 那具体数据是多少？

王华

按照常规标本量阈值，脱水2500个左右的组织块就更换一次脱水剂。染色1000张切片就全部更换新的染色试剂（这个数值在不同的实验室也是有差异的）。

您可是的标本量少，如果一个月也达不到这个量，更换试剂的频次也尽量一个月以内换。因为脱水和染色的酒精也会吸收空气中的水分导致浓度下降，苏木素染色液在使用的过程中，自来水的带入，会影响苏木素染色液的质量。

还是那句话，各自实验室的SOP 得自己通过实践优化后形成，不能照搬别人的。要以合格的质量为结果，而不是追求过程。

敲黑板~~这期精品课“提出好问题”的活动中，获奖的小伙伴是哪几位呢？

晴空万里陈平

思源

可笑青春

童话