外泌体-分离细胞外囊泡(EVs)的分离技术
不同的生物物理和生物化学性质可用于分离EV,包括大小、质量密度、形状、电荷和抗原表位。最常见的EVs分离方法的原理如下图所示。下表提供了这些方法的比较,包括每种方法的优点和局限性。有分离方法都会影响EV的浓度和纯度,一些方法可能仅用于分离EV,有些方法可以组合起来。
分离细胞外囊泡(EVs)的常用方法的工作原理。分离是基于大小、密度和免疫表型的。A:在差速离心中,分离基于尺寸,较大的EVs(灰色)较早收集在管底部,而较小的EVs(绿色)需更大的离心力才能沉淀。可溶性组分不受离心影响,但是非EV颗粒如脂蛋白和蛋白质聚集体可能与EV一同沉淀下来。 B,在密度梯度离心中,分离基于密度,并且EV将移动到其平衡密度。由于密度或相互作用相似,非EV颗粒如脂蛋白可与EV共同作用。相对于梯度具有高密度的可溶性组分将在管的底部收集。C,尺寸排阻色谱法使用大小分离的多孔基质(虚线圆圈)。可溶性组分和小于尺寸阻截值的颗粒暂时进入多孔基质,而大于阻截尺寸的EV和颗粒不会进入多孔基质。EVs和颗粒大于截止值时,可溶性组分和颗粒小于尺寸截止值。 D,在超滤中,可溶性蛋白质和小于阻截值(≈105kDa)的颗粒被推过滤器,并且在过滤器处收集EV。 E,在免疫捕获试验中,基于其免疫表型捕获EV。使用针对暴露在目标(绿色)EV上的抗原的单克隆抗体(mAb)捕获EV。 F,沉淀时,加入沉淀剂可引起EV,非EV颗粒和可溶性蛋白质的聚集。团块会沉淀,离心加速沉淀。
外泌体产品目录:血清中胎盘来源外泌体
血浆内皮细胞来源外泌体
树突状细胞来源的外泌体
外泌体circCD2AP
人内皮祖细胞(EPC)分泌外泌体
外泌体中微小RNA-126(miRNA-126)
纤维细胞分泌外泌体
胆管癌外泌体
肝癌细胞外泌体
骨髓间充质干细胞分离外泌体
小鼠肝癌细胞(H22)源外泌体
人骨髓来源间充质干细胞分泌外泌体
K562细胞分泌的外泌体
人髓核细胞(NPCs)外泌体
间充质干细胞来源外泌体
人脐带间充质干细胞来源外泌体
小鼠脂肪干细胞(ASC)释放的外泌体
人嗅黏膜间充质干细胞来源外泌体
人羊膜上皮干细胞来源外泌体
脂肪干细胞来源外泌体
大鼠髓核细胞来源外泌体
类风湿关节炎外泌体
黑色素瘤细胞来源外泌体
雪旺细胞来源外泌体
大鼠脂肪间充质干细胞来源的外泌体
牙髓干细胞(DPSCs)来源外泌体
小鼠脂肪间充质干细胞来源外泌体(ADMSC-Exo)
去卵巢大鼠血清来源外泌体
胎盘来源外泌体miRNA
miRNAs的MSCs来源外泌体
血清外泌体来源microRNA-221-3p
肝星状细胞(HSC)来源外泌体
小鼠脂肪间充质干细胞(mASCs)来源外泌体
外泌体来源microRNA
结直肠癌细胞来源外泌体
膀胱癌细胞来源外泌体
hucMSC来源外泌体