小分子半抗原与载体偶联方法
小分子属于半抗原,只有反应原性,但不具有免疫原性,只有与载体(通常为蛋白质,也有多肽)偶连后形成完全抗原,才具有免疫原性,进入动物体内后才会产生抗体。载体蛋白是一种自身就能引发免疫反应的大分子,许多不同种类的载体蛋白与小分子偶联后可制备成完全的抗原。常用的载体包括牛血清白蛋白、钥孔血蓝蛋白、卵清蛋白、牛甲状腺球蛋白等。对于载体蛋白的选择,主要涉及其溶解性、大小、偶联基团、免疫原性、成本价格等因素。目前市面上应用最为广泛的是牛血清白蛋白BSA,主要是由于BSA化学性质稳定,不易变性,分子内含有多种氨基,且赖氨酸含量高,廉价易得。但BSA由于在一些免疫检测实验中作为阻断剂而限制了它的使用。其次选择较多的是钥孔血蓝蛋白KLH以及卵清蛋白OVA。
小分子半抗原与载体偶联方法:
1,带羧基或者氨基类的化合物,用碳化二亚胺法以及混合酸酐法;
2,含巯基类的化合物,用马来酰亚胺法;
3,分子结构中带有氨基类的化合物,戊二醛法,最为常用的一种方法。
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