XL1-Blue感受态细胞
XL1-Blue感受态细胞
|
产品编号 |
产品名称 |
规格 |
|
MCC0510 |
XL1-Blue感受态细胞 |
100μl*10 |
保存条件：-80℃。
1.产品简介：
本产品是采用大肠杆菌XL1-Blue菌株经特殊工艺处理得到的感受态细胞，高效的DNA克隆和质粒扩增，能保证高拷贝质粒的稳定复制，适合非甲基化DNA的转化，可用于蓝白斑筛选。
基因型：recA1 endA1 gyrA96 thi-1 hsdR17 supE44 relA1 lac [F’ roAB laclqZ? M15 Tn10 (Tetr)]
特点：1．XL1-Blue能保证高拷贝质粒稳定复制，recA1和endA1的突变有利于插入DNA的稳定和高纯度质粒DNA的提取2．hsdR17突变导致EcoK核酸内切酶系统缺失，增强了外源DNA的稳定性和提取质量。3．lacIqZΔM15 的存在使XL1-Blue菌株可用于蓝、白斑筛选。具有四环素抗性，pUC19质粒检测，转化效率可达108cfu/μg DNA。
2.使用说明：
1．取100 μl感受态细胞置于冰浴中融化。
2．待感受态细胞融化后，向感受态细胞悬液中加入目的DNA（根据实际情况加入适量的DNA，通常100 μl感受态细胞能够被1 ng超螺旋质粒DNA所饱和），用移液器轻轻吹打混匀，冰浴30min。
3．42℃热击45sec，然后快速将离心管转移到冰浴中，冰上静置2-3min，该过程不要摇动离心管。
4．每个离心管中加入450 μl无菌的SOC或LB培养基（不含抗生素），混匀后置于37℃摇床， 150 rpm振荡培养45～60min使菌体复苏。
5．根据实验需求，取适量已转化的感受态细胞，加到含相应抗生素的SOC或LB固体琼脂培养基上，用无菌的涂布棒将细胞均匀涂开，将平板置于37℃直至液体被吸收，倒置培养，37℃培养12~16h。
3.注意事项：
1．刚化冻的细胞转化效率最高，避免反复化冻。
2．整个动作要轻柔。
*本试剂仅供实验室研究使用