国内首款CRISPR技术新冠试剂获批!

据国家药品监督管理局公布的消息：2020年12月01日医疗器械批准证明文件（准产）待领取信息发布-1，由杭州众测生物科技有限公司研发的新型冠状病毒2019-nCov核酸检测试剂盒(CRISPR免疫层析法) 获批了！

而在5月7日，Sherlock Biosciences公司就曾宣布，其开发的新冠病毒CRISPR检测试剂盒已获得美国FDA授予的紧急使用授权（EUA）。新闻稿指出，这是美国FDA首次授权使用基于CRISPR技术的新冠病毒检测。
此次药监局批准杭州众测研发的新型冠状病毒2019-nCov核酸检测试剂盒(CRISPR免疫层析法)，是国内首次批准基于CRISPR技术的新冠病毒检测。
从已公开的信息来看，此次获批的方法学为CRISPR免疫层析法，而杭州众测公司一直致力于其核心技术-RAA（重组酶介导链替换核酸扩增)的研发。由此可见该产品或采用RAA技术扩增之后，再使用CRISPR酶进行检测。
重组酶介导链替换核酸扩增技术（RAA技术），是一种在恒温核酸快速扩增技术，利用从细菌或真菌中获得的重组酶，在常温下，该重组酶可与引物DNA紧密结合，形成酶和引物的聚合体，当引物在模板DNA上搜索到与之完全匹配的互补序列时， 在单链DNA结合蛋白的帮助下，打开模板 DNA的双链结构，并在DNA聚合酶的作用下，形成新的DNA互补链，扩增产物以指数级增长。利用荧光探针的标记，可以实现定时定量的结果分析，通常 5-15min就可以得到荧光检测结果。
目前市面上常见的恒温扩增技术有十几种之多，但对于变温PCR并未构成明显的竞争优势，而CRISPR技术的出现，让恒温扩增技术又有了新的发展方向，恒温扩增能够降低设备门槛，CRISPR技术能够提高检测的敏感度，两者搭配之后，未来充满着想象。

张锋等研究组最近开发了一个名为SHERLOCK（特定高灵敏度酶解报告系统）的平台，将等温预扩增与Cas13组合起

来检测单个RNA或DNA分子。

张锋等研究组在此报告将SHERLOCKv2整合到四个方面：1）使用正交CRISPR酶的4通道单反应复合; 2）定量测量输入降至2 aM;3）通过将Cas13与辅助性CRISPR相关酶Csm6组合，使信号灵敏度提高3.5倍; 4）横向流动读出。 SHERLOCKv2可通过侧流检测登革病毒或寨卡病毒ssRNA以及患者液体活检样本中的突变，突出其作为核酸的多路复用，便携式，快速和定量检测平台的潜力。

Doudna等研究组发现目标激活的非特异性ssDNase切割也是其他V型CRISPR-Cas12酶的特性。通过将Cas12a ssDNase激活与等温扩增相结合，Doudna等研究组创建了一种名为DNA Endonuclease Targeted CRISPR Trans Reporter（DETECTR）的方法，该方法实现了DNA检测的超高的灵敏度。

时至今日，围绕CRISPR专利的问题仍存在诸多纷争，即使是核心专利也存在争议，况且已在核心专利基础上延伸出了上千个应用专利，面对上千个CRISPR专利，任何一个单位或企业都难以获得所有专利的授权。因此国内正在进行CRISPR技术的开发的企业，如何进行应用专利的保护是未来很重要的一个考题。
参考资料：医业观察、国家药监局官网通告、生物通、众测官网等，如果侵权及错误纰漏，欢迎随时留言批评指正。