点突变细胞株构建技术原理
通过sgRNA引导Cas9核酸酶切割基因组目的序列导致DNA双链断裂(Double-strand breaks, DSB)，同时以包含点突变的同源序列为模版，通过同源重组修复(Homology directed repair，HDR)的方式对目的位点进行点突变，从而获得基因组DNA指定位点引入点突变的细胞系。
技术优势
经过多步优化的CRISPR/Cas9系统，适用于更广泛的哺乳动物细胞，提高了编辑率高，同时大大降低了脱靶效应。
实验流程
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通过sgRNA引导Cas9核酸酶切割基因组目的序列导致DNA双链断裂(Double-strand breaks, DSB)，同时以包含点突变的同源序列为模版，通过同源重组修复(Homology directed repair，HDR)的方式对目的位点进行点突变，从而获得基因组DNA指定位点引入点突变的细胞系。
技术优势
经过多步优化的CRISPR/Cas9系统，适用于更广泛的哺乳动物细胞，提高了编辑率高，同时大大降低了脱靶效应。
实验流程