乳酸菌基因组编辑技术原理

基于Red同源重组和CRISPR/Cas9的乳酸菌基因组编辑服务。成熟的乳酸菌（Lactic acid）编辑体系，助您成功实现基因敲除、基因插入和点突变。

基于Red同源重组法的乳酸菌基因组改造

乳酸菌基因敲除的传统方法是利用自身的Red系统对外源进入的DNA进行同源重组，从而实现目标基因的等位替换。通过设计靶基因的同源融合片段，将其克隆至自杀载体中，自杀载体通过接合输入到靶细菌。通过抗生素筛选细菌基因组靶位点整合有自杀载体的插入突变株。在第二轮反向选择压力下，只有乳酸菌基因组发生第二次同源重组并丢失自杀质粒才可以存活。

基于CRISPR/Cas9平台的乳酸菌基因组改造

CRISPR/Cas9系统是细菌和古细菌特有的一种天然防御系统,用于抵抗病毒或外源性质粒的侵害。

研究内容

  • 乳酸菌基因敲除（Lactic acid bacteria gene knockout）

  • 乳酸菌基因敲入（Lactic acid bacteria gene knockin）

  • 乳酸菌基因点突变（Lactic acid bacteria gene point mutation）

  • 下游应用

  • 抗生素及重要工业用酶

  • 发现新的基因功能

  • 优化代谢通路，提升代谢产物产量，实现工业化生产

  • 参考文献：

  • Selle K, Barrangou R. Harnessing CRISPR–Cas systems for bacterial genome editing[J]. Trends in microbiology, 2015, 23(4): 225-232.

  • Zerbini, F., Zanella, I., Fraccascia, D., König, E., Irene, C., & Frattini, L. F., et al. (2017). Large scale validation of an efficient CRISPR/Cas-based multi gene editing protocol in Escherichia coli. Microbial Cell Factories, 16(1), 68.

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