细胞系定制流程

外源质粒DNA整合到宿主细胞染色体上，使宿主细胞可长期表达目的蛋白，称稳定细胞系。稳定细胞系在生物学研究中扮演着非常重要的角色，包括基因功能研究、重组抗体、药物开发等。然而构建一个有效的细胞系是一件复杂而费时的工作。

细胞系定制技术流程

• 载体构建- 目的基因过表达载体的构建。

• 病毒包装- 表达载体、辅助质粒共转染293FT细胞，收集病毒上清，纯化和浓缩病毒颗粒。若选择转染，则跳过此步。

• 转染、转导- 电转染或转染试剂（脂质体等）进行细胞转染，或病毒转导。

• 筛选- 根据表达载体的筛选基因选择药物进行筛选，如嘌呤霉素、G418等。

• 扩大培养- 将筛选出的单克隆细胞进行扩大培养。

• 鉴定- PCR、Q-PCR、western等从DNA、mRNA、蛋白水平进行检测。