SPF级小鼠饲养环境建造流程

SPF级实验大小鼠，即无特定病原体的大小鼠，是指除清洁大小鼠应排除的病原外，不携带主要潜在感染或条件致病和对科学实验干扰大的病原的实验大小鼠。它们的来源，既可来自无菌动物繁育的后裔，亦可经剖胎取后，在隔离屏障设施的环境中，由SPF亲代大小鼠抚育。

SPF级实验大小鼠不带有对人或动物本身致病的微生物，但不能排除可经胎盘屏障垂直传播的微生物。

以下介绍下SPF级小鼠饲养环境建造流程：

一个完整的动物饲养屏障系统，主要包括生产繁殖区、实验操作区、隔离检疫区。对 SPF 级小鼠进行饲养繁育，需要执行严格的工作流、人流、物流、动物流控制，配套系统包括空调新风系统，紫外自控系统，监控系统，房间压差监控系统等。本文就个人浅薄的工作经验，谈一谈如何从无到有地建立一个SPF级屏障系统，希望能起到抛砖引玉的作用。

建立一个SPF级屏障系统需要什么呢？

第一当然是资金，没有资金再好的规划也无法付诸实践。有了资金保障，就可以开始做总体规划。按照要求，一般的SPF级屏障系统设施分为以下三种功能区。

（一）生产繁殖区：主要负责动物的保种以及繁殖，必须严格控制人员进出，只允许保种员以及设备维护人员进出，尽量减少人员进出。需设计为淋浴进入，双走廊，单向通行，确保安全。

（二）实验操作区：主要提供实验操作的区域，必须预留操作室，以及部分小型仪器放置区域。

实验区的饲养间也可以提供操作车进行简单的实验操作。实验区人流量大，必须制定完善的规章制度约束实验操作人员，实验区内的物品需要定期清理消毒。

（三）隔离检疫区：可以规划设计屏障外的普通实验区为检疫室，用于定期检疫各区的哨兵鼠。屏障内设立各级隔离检疫室，一级隔离检疫室，主要用于外来动物的隔离检疫。设计为单走廊双屏障系统。外来动物只有经过净化后方可进入二级隔离检疫室，不可以直接转移。

明确屏障内各个功能区的大小划分后，与施工方沟通，设计饲养房间。饲养房间的大小，根据IVC及操作车的大小确定，尽量做到不浪费每一平方米。然后由施工方设计初步图纸，给排水，电路走向，空调管线等。

值得注意的有以下几点：

1.  若要引入大功率用电器，需提前布线。

2. 电梯面积应尽量大，污物梯和洁净梯可以分开。

3. 屏障外设计的洗手间淋浴房的数量要能满足实际需求。（如果是学校，女用的设施需要多一些，血泪经验）

4. 外区配套的设计，洗刷区，以及洗刷之后的洁净物品暂放区，需要规划清楚。洗刷区的给水要充足，排水要方便。

接下来是内部环境控制问题（按照国标要求）：

（一）照度和光周期：光照会影响小鼠的生物节律，光照时间可以设置为 8:00-20:00，自动控制。

（二）温湿度：温湿度会影响种鼠的生长繁殖，不适宜的温湿度下小鼠易发生多种疾病。新生小鼠的最适合温度在 22℃，温度过低会引起新生小鼠死亡。一套完整的报警系统极其有必要。此外若发现房间异常高温，应第一时间通知空调维保人员。有条件的单位应设计备用空调系统。（特别强调：备用电源UPS一定要规划好，柴油发电机功率越大越好，不怕一万就怕万一。）

（三）通风

如果有条件，建议在屏障内全部采用独立通风系统（IVC）。一个饲养房间可以放置左右两套一拖二的IVC。房间通风换风次数为15 次以上/小时，笼内的通风次数为 30-100 次/小时。室外空气经过初效过滤、中效过滤及高效过滤后进入房间及笼内，房间排风通过初效过滤和中效过滤及活性炭后排出设施。为节约能源，房间的送风有50%的重复利用，房间排风经过初效及中效过滤后重新进入本房间的送风系统。注意控制设施内的氨浓度，不得高于14mg/m3。

将IVC的监控主机放置于屏障外区的监控室内，由保安（门卫）24小时监控，一旦报警，立刻通知维保人员。

风速用风速仪测定，风量用风量罩均每月测定并记录。笼具内由于换气次数较高，在保证换气效率的同时要严格控制气流的速度（0.1-0.2m/s），防止对小鼠的正常生理活动产生干扰。

另需要定期更换过滤器：初效过滤器6次/年，（设计专门晾洗初效过滤器的地方），中效过滤器 2 次/年，高效过滤器1次/年。换高效过滤器时候要注意，避免污染屏障环境。

（四）压差：

生产繁殖区：正压系统，压差应大于 10Pa

实验操作区：正压系统，压差应大于 10Pa

隔离检疫净化区：负压系统，压差应大于 10Pa

（五）噪音：

饲养房间内要求噪音小于 60dB，房间内不允许使用收音机，警报器等发声装置。饲养房间墙面为彩钢板，可有效减少并隔离噪音。饲养房间应在一楼，并且远离洗刷间，通风笼具系统鼓风机应位于技术夹层，可以有效降低振动。

人与动物的听力范围不同，动物能听到人听力范围外的超声波，有些仪器产生的噪音与振动只有动物能听到与感受。注意观察饲养过程中动物的异常行为，及时记录报告。

完成规划设计，解决了内部环境控制问题。最后，还需要制定标准操作规程以及动物转移流程，上网公开。确保工作人员、实验人员严格按照操作规程操作。

操作不规范，小鼠白白养。

以下再列几处需要注意的细节：

1、屏障区内的小细节：屏障区内须有清晰，明显的标志标识，可以用车贴这种材质。每个房间可以配备电话或者智能终端系统，方便联系。

2、生产繁殖区的小细节：注意种群的繁殖，不要轻易引种或者更换种子群。严格按照近交系，封闭群的繁殖要求进行配对繁殖。

3、实验操作区：严格控制带入屏障的物品，活体动物的组织坚决不允许带入。操作室内可以配备冰箱，超净台，储物柜，台灯，无影灯，显微镜，小型离心机，iPad，等小型仪器。

4、隔离检疫区：需做好人员防护，以及病原微生物的及时检验检疫。