Knockout小鼠模型测序结果示意图

如下图所示，图A为野生型小鼠PCR 产物测序峰图。图B为阳性F0 代小鼠基因型鉴定PCR 产物测序峰图。CRISPR/Cas9 作用后，由于发生NHEJ随机修复，产生多种基因型，在Cas9 切点附近出现杂峰。图C为阳性F1 代小鼠基因型鉴定PCR 产物测序峰图。阳性F1 小鼠基因组一个拷贝是野生型，一个拷贝是突变体，在Cas9 作用位点附近区域测序有后双峰现象（两种基因型产生了两种峰型）。图C’ 和图C”是图C中测序PCR 产物连接T-vector 后，单克隆测序结果。其中，图C’ 为野生型，图C” 为突变体。峰型对比可以发现C” 较C’ 缺失了两个碱基CC。C’ 和C” 峰型结果可以和C 图峰型结果向吻合。